Механизм удаления сигнальной последовательности сигнальной пептидазой (SPC)

Обновлено: 08.05.2024

Соединение аминокислот с образованием полипептидной цепи - это только первый шаг в процессе формирования многих белков. Полипептидная цепь должна быть уложена так, чтобы образовались правильные вторичная и третичная структуры, а в большинстве случаев отдельные полипептиды должны объединиться в функциональные олигомерные комплексы. До образования функционально активных белков первичные продукты трансляции часто претерпевают разные сложные изменения.

Посттрансляционная модификация полипептидных цепей (примеры)

Функционально активный гемоглобин образуется только после того, как α- и β-цепи объединятся в а₂β₂-структуру и с боковыми группами аминокислот обеих субъединиц свяжется гемогруппа. Для того чтобы пируваткарбоксилаза и ацетил-СоА-карбоксилаза стали активными ферментами, с определенными боковыми цепями их аминокислот должен ковалентно связаться биотин. Некоторые белки, участвующие в процессе свертывания крови, должны претерпеть карбоксилирование специфических остатков глутаминовой кислоты, для того чтобы образовались центры связывания Са 2+ . Для образования коллагена должно произойти гидроксилирование специфических пролиновых и лизиновых остатков.

Очень важным и широко распространенным способом регуляции метаболизма являются фосфорилирование и дефосфорилирование определенных остатков серина, треонина и тирозина особыми протеинкиназами и протеинфосфатазами соответственно. Многие протеолитические белки, участвующие в процессах пищеварения и свертывания крови, синтезируются в виде крупных предшественников, которые далее активируются путем отщепления участка полипептидной цепи. Инсулин синтезируется в виде препроинсулинового полипептида и превращается в зрелый инсулин после расщепления цепи и удаления сначала N-концевого, а затем внутреннего сегмента (рисунок 1, прилагается). Многие вирусные белки, гормоны, нейропептиды образуются из первичных трансляционных продуктов-полипротеинов в результате расщепления по многим сайтам и образования нескольких зрелых белков и пептидов меньшего размера.

В клетках эукариот помимо плазматических мембран имеются разнообразные внутриклеточные мембраны, отграничивающие различные клеточные органеллы: митохондрии, хлоропласты (у растений), эндоплазматический ретикулум, аппарат Гольд-жи, пероксиомы, лизосомы и секреторные пузырьки (везикулы).

Транспортный аппарат эукариотических клеток.

Рибосомы в эукариотических клетках существуют в двух состояниях: в свободном и связанном с мембранами. Белки, предназначенные для некоторых органелл и цитозоля, синтезируются на свободных рибосомах, а белки, остающиеся в лизосомах, структурах Гольджи и плазматической мембране, образуются на рибосомах, ассоциированных с эндоплазматическим ретикулумом. Белки, синтезированные на рибосомах, связанных с ЭПР, проходят через мембраны в просвет ЭПР, а «прокладывает» им путь N-концевой участок. Затем этот участок, состоящий преимущественно из гидрофобных аминокислот, сигнальная последовательность - отщепляется специфическими эндопептидазами, локализованными в просвете ЭПР. Такой направленный перенос белка от рибосом в просвет ЭР начинается уже во время синтеза полипептидной цепи и поэтому называется котрансляционным транспортом.

Направление синтезируемых полипептидных цепей в просвет ЭПР.

Транспорт мембранных и секретируемых белков в просвет ЭР опосредуется взаимодействием полипептидной сигнальной последовательности с сигнал-распознающей частицей (СРЧ) и рецептором этой частицы (СРЧ-Р). Белки цитозоля синтезируются на рибосомах, идентичных рибосомам, синтезирующим белки ЭПР. В самом деле, рибосома, в одном раунде синтезирующая белок цитозоля, в следующем может синтезировать мембранный белок. Попадание белка в ЭР происходит только в результате взаимодействия СРЧ с сигнальной последовательностью синтезируемой белковой цепи (рисунок 2, прилагается). Комплекс «СРЧ-сигнальная последовательность» взаимодействует впоследствии с рецептором СРЧ, локализованным в мембране ЭПР. Таким образом, СРЧ служит адаптером между аппаратом синтеза белка в цитоплазме и аппаратом его доставки и отвечает за попадание белков в просвет ЭПР. СРЧ связывается с сигнальной последовательностью сразу после выхода ее из рибосомы, т.е. после синтеза сегмента длиной примерно 70 аминокислот. Элонгация полипептидной цепи замедляется до тех пор, пока комплекс СРЧ-сигнальная последовательность не свяжется с СРЧ-Р в мембране ЭР. Сразу после этого СРЧ отделяется, скорость синтеза полипептидной цепи увеличивается и растущая полипептидная цепь протягивается сквозь мембрану в просвет. Таким образом, ассоциация транслирующей рибосомы с СРЧ-Р приводит к однонаправленному переносу растущей полипептидной цепи в просвет ЭПР. Особая пептидаза, локализованная в просвете ЭР, осуществляет специфическое отщепление сигнальной последовательности от новосинтезированного белка.

СРЧ представляет собой комплекс из шести белков с мол. массами от 10000 до 75000 Да и единственной молекулы РНК длиной 300 нуклеотидов-7SL-PHK. Ни РНК, ни белки сами по себе не могут функционировать как СРЧ. Однако при смешивании РНК и белков образуется функциональная СРЧ.

Сигнальная последовательность обычно находится на N-конце белков, предназначенных для экспорта к одной из клеточных мембран или внутриклеточным органеллам. Длина сигнальной последовательности колеблется от 15 до 35 аминокислот, и в первых трех ее четвертях преобладают гидрофобные остатки, однако никакой консервативной аминокислотной последовательности этот участок не имеет. Для узнавания сигнальной последовательности СРЧ скорее важна ее вторичная структура. В пределах сигнальной последовательности находится также и сайт, распознаваемый сигнальной пептидазой. Обычно расщепление происходит со стороны С-конца остатков глицина, серина или аланина, поэтому N-конец многих зрелых секретируемых или мембранных белков соседствует с одной из этих аминокислот в сигнальной последовательности.

Транспорт белков от ЭПР к аппарату Голъджи и из него.

Белки направляются к лизосомам, плазматическим мембранам или секретируются с помощью аппарата Гольджи - набора тесно упакованных, взаимопроникающих, окруженных мембранами цистерн. Перенос белков к аппарату Гольджи осуществляется с помощью так называемых окаймленных пузырьков (везикул), отпочковывающихся от ЭПР и сливающихся с цистернами Гольджи. Белки проходят через аппарат Гольджи от цис-цистерн к транс. Транспорт белков через цистерны также осуществляется с помощью окаймленных транспортных везикул.

Белки, предназначенные для секреции, сначала попадают в секреторные везикулы, которые в конце концов сливаются с плазматическими мембранами и высвобождают свое содержимое наружу. Когда секреция белков индуцируется (как в случае инсулина или некоторых нейропептидов), цитозольные секреторные пузырьки сливаются с мембраной и высвобождают содержимое наружу только после индукции.

Гликозилирование.

Проходя через ЭПР и аппарат Гольджи, белки подвергаются интенсивной модификации. Специальный фермент ЭПР присоединяет разветвленный олигосахарид к специфическим аспарагиновым остаткам транспортируемых белков. Далее олигосахарид подвергается действию целого ряда специфических гликозилгидролаз и гли-козилированию. Эти реакции протекают и в ЭПР, и в то время, когда белки проходят через аппарат Гольджи.

Самое популярное на сайте:

Виды административных правонарушений Характеристика общего состава административного правонарушения предполагает анализ и последующую классификацию родовых составов.
Понятие и виды трудового стажа Трудовой стаж — это суммарная продолжительность не только трудовой.
Гарантии конституционных прав, свобод, обязанностей Гарантии прав и свобод человека и гражданина. Гарантии прав и свобод человека и гражданина - условия.
Партограмма - правила заполнения Может быть единственным документом наблюдения за течением нормальных родов.
Внутренняя среда организации Внутренняя среда организации - это перечень всех внутриорганизационных факторов.

Сигнальные пептидазы

Для удаления временных N-концевых сигнальных пептидов необходимы специфические белки. Наиболее полно охарактеризованы сигнальные протеазы из Е.coli. Большинство экспортируемых белков Е.coli содержат сигнальный пептид, который отщепляется на периплазматической поверхности внутренней мембраны с помощью лидер-пептидазы; ее структура представлена на рис.2.

Рис.2. Предполагаемая топология лидер-пептидазы из Е.coli.

Аминокислотные остатки пронумерованы. Прямоугольниками обозначены гидрофобные сегменты. Первый гидрофобный участок не был обнаружен экспериментально, вывод о его существовании был сделан исходя из его гидрофобности. Наличие и ориентация второго гидрофобного участка установлены экспериментально и, по-видимому, он функционирует как внутренняя сигнальная последовательность. Третий гидрофобный сегмент имеет слабо выраженный гидрофобный характер и является частью периплазматического домена.

Для переноса белков через внутреннюю мембрану эта пептидаза не нужна, но она необходима для высвобождения экспортируемого белка из цитоплазматической мембраны. In vitro очищенный фермент мог функционировать, будучи включенным в липосомы. Специфичность расщепления весьма высока, но не определяется исключительно аминокислотной последовательностью вблизи сайта расщепления. Сигнальная пептидаза, функционирующая в эндоплазматическом ретикулуме, имеет ту же специфичность, что и соответствующий фермент Е.coli, что неудивительно, если учесть сходство сигнальных последовательностей. Была очищена сигнальная пептидаза из микросом эукариот. Показано, что она ассоциирована с другими полипептидами, возможно имеющими отношение к механизму переноса.

У Е.coli имеется вторая сигнальная пептидаза, участвующая в процессинге пролипопротеинов. Эти полипептидные компоненты оболочки Е.coli замечательны тем, что при созревании их N-конец модифицируется с помощью глицерида. Пролипопротеиновая сигнальная пептидаза также находится в цитоплазматической мембране. После отщепления сигнальный пептид остается в цитоплазматической мембране и разрушается с помощью мембраносвязанного фермента протеазы ΙV.

В митохондриях и хлоропластах должно присутствовать несколько сигнальных пептидаз, поскольку процессинг происходит более чем в одном компартменте. Растворимую пептидазу из митохондриального матрикса удалось частично очистить, но охарактеризована она не полностью.

4. Растворимые и мембраносвязанные белки, необходимые для

Идентифицировано несколько цитозольных и мембраносвязанных белковых компонентов, необходимых для переноса. Наиболее детально охарактеризованы белковые факторы, участвующие во встраивании белков в эндоплазматический ретикулум млекопитающих (рис.3).

1. Сигнал-распознающая частица (СРЧ). Это растворимый рибонуклеопротеиновый комплекс, состоящий из шести разных белков и молекулы 7S-РНК. СРЧ необходима для инициации переноса. Она связывается с сигнальной последовательностью образующегося полипептида во время его синтеза на рибосоме. Для препролактина, например, константа диссоциации составляет 1нМ. С помощью метода фотохимического сшивания был идентифицирован один из полипептидов (54 кДа), непосредственно взаимодействующий с сигнальной последовательностью предшественника. По некоторым данным, полученным для бесклеточных систем, связывание СРЧ ингибирует трансляцию или вызывает ее задержку. Впрочем, не исключено, что этот феномен является артефактом; во всяком случае, как было показано на модельных опытах, его не обязательно привлекать для объяснения кинетики переноса белков in vivo. Одна из вероятных функции СРЧ состоит в предотвращении неправильного свертывания образующегося полипептида, которое может блокировать перенос (например, из-за экранирования сигнальных последовательностей). Задержка трансляции должна уменьшать вероятность такого ошибочного свертывания и, следовательно, увеличивать эффективность переноса белков.

Рис.3. Схематическое изображение ранних стадий котрансляционного переноса полипептида через эндоплазматический ретикулум млекопитающих.

Сигнал-распознающая частица и СРЧ-рецептор (стыковой белок) хорошо охарактеризованы. Мембраносвязывающий сигнальный рецептор изображен как компонент канала через мембрану, но существование таких каналов и роль сигнального рецептора не бесспорны. После образования комплекса между сигнальным пептидом и мембраносвязанным рецептором на стадии 3 СРЧ и стыковочный белок могут диссоциировать и принимать участие в новом цикле, оставляя мембраносвязанную рибосому и образовавшуюся цепь присоединенными к аппарату переноса.

2. Рецептор СРЧ, или стыковочный белок. Комплекс СРЧ/рибосома/образующаяся полипептидная цепь транспортируется в шероховатый эндоплазматический ретикулум, преодолевая энергию сильного взаимодействия между СРЧ, называемым также стыковочным белком. Рецептор СРЧ содержит субъединицу с молекулярной массой 73 кДа, присоединенную N-концом к мембране. Вероятно, рибосома также связывается со специфическими рецепторами, присутствующими в мембране.

3. Рецептор сигнальной последовательности. Сигнальная последовательность на образующейся полипептидной цепи перемещается от СРЧ ко второму рецептору, находящемуся в мембране и называемому рецептором сигнальной последовательности. Об этом свидетельствуют результаты опытов по фотохимическому сшиванию, в которых используется метка, связанная с сигнальной последовательностью препролактина. Предполагаемый мембраносвязанный рецептор представляет собой гликопротеин с молекулярной массой 35 кДа. Возможно, он образует часть канала, через который осуществляется перенос. С помощью такого же подхода с использованием поперечной сшивки и синтетического сигнального пептида был обнаружен еще один кандидат на роль рецептора сигнальной последовательности (45 кДа). Связь между этими двумя белками неизвестна и функции их до конца не установлены. Как только образовавшаяся полипептидная цепь связывается с мембраносвязанным рецепторм, СРЧ и ее рецептор могут освободиться от рибосомы и принять участие в новом цикле. О предполагаемом канале, участвующем в переносе, ничего неизвестно; очистка его является довольно сложной задачей.

Большая Энциклопедия Нефти и Газа

Сигнальная последовательность ( Signal region, initiator element) Нуклеотидная последовательность в гене, служащая местом связывания белка ( фактора транскрипции), который регулирует транскрипцию. [1]

Такие сигнальные последовательности в конце концов удаляются с помощью особых пептидаз. [3]

Отщепление сигнальной последовательности у люминальной стороны мембраны, обращенной в межмембранный просвет эндоплазматического ретикулума, по-видимому, приводит к тому, что гидрофобность растущего пептида уменьшается, и его пребывание в липидном бислое становится менее выгодным, чем переход в водную фазу межмембранного просвета. Соответственно, в зависимости от аминокислотного состава и последовательности, в водную фазу будут вытолкнуты либо лишь его водорастворимая часть ( скажем, N-концевая часть), как в случае многих трансмембранных белков, либо весь белок по завершении его синтеза, как в случае секретируемых белков. [4]

Сравнение сигнальных последовательностей белков , продуцируемых одной железой, показывает поразительное сходство. [6]

Вторичная структура мРНК в районе сигнальной последовательности и инициирующего кодоиа оказывает влияние на эффективность инициации трансляции. [8]

Используя эписомный экспрессирующий вектор с сигнальной последовательностью сс-фак-тора , удалось получить правильным образом модифицированный, биологически активный белок гирудин: он синтезировался и секретиро-вался штаммом S. Ген гирудина был выделен из клеток беспозвоночного - пиявки Hirudo medicinalis. Этот белок является мощным антикоагулянтом и не вызывает нежелательных иммунологических реакций у человека. [9]

Это происходит потому, что в сигнальных последовательностях , управляющих транскрипцией и трансляцией в различных прокариотических организмах, много общего. Однако экспрессия генов эукариот в бактериях наблюдается очень редко, если не создавать специальные условия. [10]

После проникновения через мембраны эндоплазматического рети-кулума теряются сигнальные последовательности . [11]

Аминокислотной последовательности интерферона предшествует типичная для секреторных белков сигнальная последовательность , селективно отщепляемая во время или сразу после прохождения мембраны. [12]

Следует подчеркнуть, что остановка элонгации по выходе сигнальной последовательности из рибосомы представляется очень важной для нормальной секреции ( или вхождения4 мембрану) синтезируемого белка. [13]

Оказалось, что в эукариотических клетках рибосома с экспонированной сигнальной последовательностью растущего пептида действительно сначала взаимодействует со специальной малой частицей, получившей название сигналузнающей частицы или SRP. Частица представляет собой 11S рибонуклеопротеид, содержащий 7S РНК длиной около 300 нуклеотидов и шесть белков ( полипептидов) с молекулярными массами 72000, 68000, 54000, 19000, 14000 и 9000 дальтон; все эти компоненты находятся в частице в эквимолярных количествах, по одному на частицу. Частицы, по-видимому, универсальны, во всяком случае среди эукариот. Они имеют определенное сродство к мембране эндоплазматиче-ского ретикулума, так что могут находиться с ней в лабильной и обратимой ассоциации, хотя значительная их часть представляет собой растворимый цитоплазматический компонент. Кроме того, они имеют некоторое, относительно небольшое, сродство и к рибосомам. Присутствие на рибосоме сигнального пептида повышает сродство рассматриваемых частиц к рибосоме на несколько порядков. [14]

После фиксации рибосомы на мембране и образования канала необходимость в сигнальной последовательности исчезает и она отщепляется особым ферментом - сигнальной пепти-дазой. Поэтому при определении последовательности аминокислот в полностью синтезированной молекуле гормона не удается обнаружить в нем наличие сигнального пептида. После завершения синтеза белковой цепи рибосома освобождается и уходит в цитоплазму, канал ликвидируется, а полностью синтезированный пептид или белок оказывается вне матрикса цитоплазмы. Он поступает в аппарат Гольджи или в запасающие гранулы, а затем секретируется клеткой в среду. Блобел назвал белок, имеющий в своем составе сигнальный пептид, прегормоном. [15]

Сигнальный пептид - Signal peptide

A сигнальный пептид (иногда обозначаемый как сигнальная последовательность, сигнал нацеливания, сигнал локализации, последовательность локализации, транзитный пептид, лидерная последовательность или лидерный пептид ) представляет собой короткий пептид (обычно 16-30 амино кислоты длиной), присутствующие на N-конце большинства вновь синтезированных белков, которые предназначены для секреторного пути. Эти белки включают те, которые находятся либо внутри определенных органелл (эндоплазматический ретикулум, Гольджи или эндосомы ), секретируются из клетки или встроены в большинство клеточных мембран. Хотя большинство мембраносвязанных белков типа I имеют сигнальные пептиды, большая часть мембраносвязанных белков типа II и многопролетных белков нацелена на секреторный путь посредством их первый трансмембранный домен, который биохимически напоминает сигнальную последовательность, за исключением того, что он не расщепляется. Они представляют собой своего рода целевой пептид.

Содержание

1 Функция (транслокация)
2 Структура сигнального пептида
3 Совместная транслокационная транслокация в сравнении с посттрансляционной транслокацией
4 Сигнальные пептиды определяют эффективность секреции
5 Характеристики уровня нуклеотидов
6 Секреция без сигнального пептида
7 Номенклатура
8 См. Также
9 Ссылки
10 Внешние ссылки

Функция (транслокация)

Сигнальные пептиды действуют, побуждая клетку перемещать белок, обычно к клеточной мембране. В прокариотах сигнальные пептиды направляют вновь синтезированный белок в канал, проводящий белок SecYEG, который присутствует в плазматической мембране. Гомологичная система существует у эукариот, где сигнальный пептид направляет вновь синтезированный белок в канал Sec61, который имеет структурную гомологию и гомологию последовательностей с SecYEG, но присутствует в эндоплазматическом ретикулуме. Оба канала SecYEG и Sec61 обычно называют транслоконом , а прохождение через этот канал известно как транслокация. В то время как секретируемые белки проходят через канал, трансмембранные домены могут диффундировать через латеральные ворота транслокона, чтобы разделиться на окружающую мембрану.

Структура сигнального пептида

Ядро сигнального пептида содержит длинный участок гидрофобных аминокислот (около 5-16 остатков), который имеет тенденцию образовывать единую альфа-спираль и также называется «h-областью». Кроме того, многие сигнальные пептиды начинаются с короткого положительно заряженного участка аминокислот, который может помочь обеспечить правильную топологию полипептида во время транслокации с помощью того, что известно как правило положительного внутреннего . Из-за его близкого расположения к N-концу его называют «n-областью». В конце сигнального пептида обычно находится участок аминокислот, который распознается и расщепляется сигнальной пептидазой и поэтому называется сайтом расщепления. Однако этот сайт расщепления отсутствует в трансмембранных доменах, которые служат сигнальными пептидами, которые иногда называют сигнальными якорными последовательностями. Сигнальная пептидаза может расщепляться во время или после завершения транслокации с образованием свободного сигнального пептида и зрелого белка. Затем свободные сигнальные пептиды перевариваются специфическими протеазами. Более того, разные целевые местоположения нацелены на разные типы сигнальных пептидов. Например, структура пептида-мишени, нацеленного на митохондриальную среду, отличается по длине и показывает чередующийся рисунок небольших положительно заряженных и гидрофобных участков. Сигнальные пептиды, направленные на ядро, можно найти как на N-конце, так и на C-конце белка, и в большинстве случаев они сохраняются в зрелом белке.

Можно определить аминокислотную последовательность N-концевого сигнального пептида с помощью деградации по Эдману, циклической процедуры, при которой аминокислоты отщепляются по одной за раз.

Совместная транслокационная транслокация в сравнении с посттрансляционной транслокацией

Как у прокариот, так и у эукариот сигнальные последовательности могут действовать ко-трансляционно или посттрансляционно.

Путь совместной трансляции инициируется, когда сигнальный пептид выходит из рибосомы и распознается частицей распознавания сигнала (SRP). Затем SRP останавливает дальнейшую трансляцию (остановка трансляции происходит только у эукариот) и направляет комплекс сигнальная последовательность-рибосома-мРНК к рецептору SRP, который присутствует на поверхности либо плазматической мембраны (у прокариот), либо ER (у эукариот). Как только нацеливание на мембрану завершено, сигнальная последовательность вставляется в транслокон. Затем рибосомы физически стыкуются с цитоплазматической стороной транслокона, и синтез белка возобновляется.

Посттрансляционный путь инициируется после завершения синтеза белка. У прокариот сигнальная последовательность посттрансляционных субстратов распознается белком-шапероном, который передает белок к SecA АТФазе, которая, в свою очередь, прокачивает белок через транслокон. Хотя известно, что посттрансляционная транслокация происходит у эукариот, она плохо изучена. Однако известно, что у дрожжей для посттрансляционной транслокации требуется транслокон и два дополнительных мембраносвязанных белка, Sec62 и Sec63.

Сигнальные пептиды определяют эффективность секреции

Сигнальные пептиды являются чрезвычайно гетерогенными, и многие прокариотические и эукариотические сигнальные пептиды функционально взаимозаменяемы даже между разными видами, однако эффективность секреции белка во многом определяется сигнальным пептидом.

Особенности уровня нуклеотидов

У позвоночных область мРНК, которая кодирует сигнальный пептид (т.е. область, кодирующую сигнальную последовательность, или SSCR), может функционировать как элемент РНК со специфической активностью. SSCR способствуют экспорту ядерной мРНК и правильной локализации на поверхности эндоплазматического ретикулума. Кроме того, SSCR имеют специфические особенности последовательности: они имеют низкое содержание аденина, обогащены определенными мотивами и, как правило, присутствуют в первом экзоне в частота выше ожидаемой.

Секреция без сигнального пептида

Белки без сигнальных пептидов также могут секретироваться нетрадиционными механизмами. Например. Интерлейкин, Галектин. Процесс, посредством которого такие секреторные белки получают доступ к внешней части клетки, называется секрецией нетрадиционного белка (UPS). У растений даже 50% секретируемых белков могут быть UPS-зависимыми.

Номенклатура

Сигнальные пептиды не следует путать с лидерными пептидами, иногда кодируемыми лидерной мРНК, хотя оба иногда неоднозначно упоминаются как «лидерные пептиды». Эти другие лидерные пептиды представляют собой короткие полипептиды, которые не участвуют в локализации белка, но вместо этого могут регулировать транскрипцию или трансляцию основного белка и не являются частью конечной последовательности белка. Этот тип лидерного пептида в первую очередь относится к форме регуляции генов, обнаруживаемой у бактерий, хотя аналогичный механизм используется для регуляции эукариотических генов, который называется uORF (открытые рамки считывания, расположенные выше по течению).

Сигнальная пептидаза - Signal peptidase

Сигнальные пептидазы ферменты, которые превращают секреторные и некоторые мембранные белки в их зрелые или проформы путем отщепления своих сигнальных пептидов от их N-концов.

Сигнальные пептидазы первоначально наблюдались в эндоплазматическом ретикулуме. (ER) -производные мембранные фракции, выделенные из клеток миеломы мыши. Ключевое наблюдение Сезара Мильштейна и его коллег заключалось в том, что легкие цепи иммуноглобулина продуцировались в форме с более высокой молекулярной массой, которая подвергалась процессингу фракцией мембран ER. За этим открытием сразу последовало открытие механизма транслокации . Сигнальные пептидазы также обнаружены в прокариотах, а также в механизмах импорта белков митохондрий и хлоропластов.

Все сигнальные пептидазы, описанные до сих пор, являются сериновыми протеазами. Активный сайт, который эндопротеолитически отщепляет сигнальные пептиды от транслоцированных белков-предшественников, расположен во внецитоплазматическом сайте мембраны. Эукариотическая сигнальная пептидаза представляет собой составной комплекс мембранный белок. Первой субъединицей, которая была идентифицирована генетикой дрожжей, является Sec11, мембранный белок 17 кДа, связанный с тремя субъединицами, названными Spc3p (21 кДа), Spc2p (18 кДа) и Spc1p (11 кДа). Sec11 является единственным существенным фактором процессинга сигнального пептида, что может быть определено по дефекту роста при его делеции. Функциональный комплекс сигнальной пептидазы сначала был очищен из фракции мембран ER собаки. Пять субъединиц млекопитающих названы / 23 в соответствии с их молекулярной массой.

Читайте также: