Калицивирусы. Особенности калицивирусов. Вирус Норволк.

Обновлено: 25.04.2024

Калицивирусная инфекция кошек — респираторная болезнь, протекающая у молодых кошек остро, у взрослых — хронически. Распространена повсеместно. Ранее эту инфекцию называли пикорнавирусной инфекцией.

Характеристика возбудителя. Вирус впервые выделил и описал Фостьер в 1957 г. в США. Относится к семейству Caliciviridae. Диаметр вириона 45 нм, сердцевины 20 нм. Вирионы имеют 32 капсомера, уложенных по кубической симметрии. Суперкапсидная оболочка отсутствует. Геном вируса представлен одной молекулой односпиральной, линейной РНК позитивной полярности. У калицивирусов кошек выявлено 7 эпитопов нейтрализации, 4 из них располагаются на капсидном белке с примерной молекулярной массой 67 кД. Все вирионы разделяют на полные вирионы и 156S-частицы. Те и другие индуцируют вируснейтрализующие антитела.

Устойчивость к физико-химическим воздействиям. Вирус довольно устойчив к воздействию эфира, хлороформа, гуанидина, дизокихолата натрия и к pH 4—5. Чувствителен к нагреванию — инактивируется при 50 °С в течение 30 мин. Установлена частичная устойчивость против термо — и pH-инактивации солью натрия.

Антигенная структура. Не изучена.

Антигенная активность, вариабельность и родство. У переболевших кошек обнаруживают вируснейтрализующие антитела. Штаммы калицивируса кошек в агглютининовом отношения родственны.

Культивирование вируса. Калицивирус кошек культивируют в культуре клеток почки котят. ЦПИ в культуре клеток наблюдают через 24—36 ч. В культуре клеток эмбриона кошек вирус выявляется в цитоплазме пораженных клеток. Зараженные клетки содержат тельца-включения. В первичных, перевиваемых и диплоидных культурах клеток титр вируса достигает 10 6 —10 8 ТЦД₅₀/мл.

Клинические признаки. Калицирусы кошек слабовирулентны и болезнь обычно протекает латентно. Однако при поражении молодых кошек и в случае сочетания с другими агентами бактериальной, вирусной и микоплазмозной природы калицивирусная инфекция может вызывать гибель до 86 % кошек. Преимущественно тяжело болеют молодые животные.

Болезнь характеризуется поражением верхних дыхательных путей. У больных животных отмечают серьезный конъюнктивит, ринит, одышку, кашель, депрессию. Кроме того, при более тяжелом печении болезни у животных наблюдают лихорадку, пневмонию, на слизистых языка, нёба, ноздрей — изъязвления.

Патологоанатомические изменения. Характерно неспецифическое катаральное воспаление верхних дыхательных путей.

Источник инфекции — больные животные. Инфекция передается при непосредственном контакте и аэрогенно.

Диагностика. Основана на анализе эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений с результатах лабораторных исследований.

Лабораторная диагностика. Для исследований в лабораторию направляют от больных животных смывы со слизистых оболочек верхних дыхательных путей, от трупов — слизистые оболочки.

Обнаружение вируса проводят с помощью ПЦР, РИФ и биопробы. Метод ПЦР дает возможность установить минимальные количества вируса и обладает высокой специфичностью. Для обнаружения вируса используют и РИФ. Изучение препаратов в ГИФ также обладает высокой чувствительностью и специфичностью. При постановке биопробы заражают исследуемым материалом котят, которые погибают через 20 дней.

Идентификацию выделенного вируса проводят PH в культуре клеток.

Специфические антитела у животных-реконвалесцентов также изучают в PH.

Иммунитет и специфическая профилактика. Переболевшие кошки приобретают иммунитет продолжительностью до 6 мес. В нашей стране для специфической профилактики болезни применяют ассоциированную инактивированную вакцину, изготовленную из штаммов вирусов панлейкопении, ринотрахеита, калицивирусной инфекции и возбудителя хламидиоза кошек. Ее вводят подкожно в области лопатки котятам дважды: в возрасте 8—12 недель и через 21—28 дней после первой вакцинации. Ревакцинируют животных в возрасте 12 мес, затем ежегодно. Введение вакцины сопровождается образованием специфических гуморальных (IgM и IgG), а также секреторных (IgA) антител в респираторном тракте.

Калицивирусы. Особенности калицивирусов. Вирус Норволк.

Вирусные гепатиты. Возбудители вирусных гепатитов. Социальная значимость вирусных гепатитов.

Вирусные гепатиты — группа полиэтиологичных антропонозных вирусных поражений печени с различными механизмами и путями передачи возбудителей.

Впервые отделить инфекционный гепатит от прочих поражений печени предложил выдающийся отечественный терапевт С.П. Боткин (1888). Клинико-морфологическая картина заболеваний характеризуется преимущественным развитием диффузного воспалительного процесса в печёночной ткани с соответствующими астеновегетативными и общетоксическими проявлениями, желтухой, гепатоспленомегалией и рядом возможных внепечёночных поражений (артриты, узелковые периартерииты, гломерулонефриты и т.д.).

Причиной вирусных гепатитов могут быть различные вирусы (например, возбудитель жёлтой лихорадки или герпес-вирусы). Однако развитие тяжёлого, клинически манифестного поражения печени при этих инфекциях либо непостоянно, либо возникает только у пациентов с иммунодефицитами.

К возбудителям вирусных гепатитов относят вирусы различных таксономических групп; всех их отличает способность преимущественно выбывать специфические поражения клеток печени. В настоящее время выделяют 8 типов возбудителей вирусного гепатита, обозначаемых заглавными латинскими буквами, соответственно, от А до G и вирус TTV [от англ. transfusion transmitted virus, трансфузионно передающийся вирус.

Наличие вирусного гепатита F признают не все исследователи, а полная характеристика TTV (предположительно парвовируса), открытого лишь в 1997 г., отсутствует.

Социальная значимость и экономический ущерб, наносимый вирусными гепатитами, очень высоки, что и определяет их как серьёзную проблему здравоохранения. В частности, гепатитом А ежегодно заболевают более 1 млн человек, а количество носителей вируса гепатита В в мире превышает 1 млрд. В настоящее время наиболее полно охарактеризовано 5 возбудителей вирусных гепатитов. С учётом эпидемиологических особенностей выделяют следующие вирусные гепатиты.

• Вирусные гепатиты с парентеральным (кровяно-контактным) механизмом передачи (гепатиты В, С, D, G и TTV). Возбудители передаются трансфузионным, инъекционным, перинатальным и половым путями. Кроме того, возможна передача вирусов гепатитов В и D при тесном бытовом контакте. Потенциально любая ситуация, включающая контакт с инфицированной кровью, может привести к заражению. Для инфекционных процессов, вызванных вышеназванными вирусами, характерно хроническое течение заболевания и вирусоносителъство.

• Вирусные гепатиты с энтеральным (фекально-оральным) механизмом передачи (гепатиты А, Е и, предположительно, F). Возбудители передаются пищевым, водным и контактным путями. Также не исключены гемотрансфу-зионный и половой пути заражения. Для заболеваний характерна сезонность (осенне-зимняя), преимущественное поражение детей и взрослых лиц молодого возраста. Инфекционные процессы, вызванные вышеназванными вирусами, — всегда острые, обычно протекают благоприятно и без формирования вирусоносительства.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Калицивирусы. Семейство калицивирусов. Строение калицивирусов.

Семейство Caliciviridae объединяет большую группу сходных по морфологии и отличных по антигенным свойствам РНК-позитивных однонитевых вирусов, вирионы которых имеют характерную морфологию с чашеобразными углублениями на сферической поверхности капсида, откуда происходит их название (calyx, или chalice - чаша).

В составе семейства 4 рода: везивирусы, лаговирусы, Норфолк-подобные вирусы (норовирусы) и Саппоро-подобные вирусы (саповирусы). Первые два рода включают вирусы, патогенные для животных, последние два рода включают в основном вирусы, патогенные для человека. Совсем недавно считали, что калицивирусы имеют ограниченный круг хозяев и поражают только свиней, кошек и морских львов. Однако за последнее время получены изоляты от моржей, людей, обезьян, телят, цыплят, норок, рептилий, амфибий и насекомых. Патогенность одних калицивирусов для естественного хозяина доказана, для других — требует выяснения. Некоторые из них еще недостаточно изучены.

Прототипным вирусом семейства является вирус везикулярной болезни свиней (ВЭС). Вызываемое им заболевание впервые обнаружено в 1932 г. в Южной Калифорнии и ликвидировано в США в 1956 г. В настоящее время ВЭС считается экзотической болезнью, хотя вирус все еще присутствует у морских млекопитающих и представляет потенциальную угрозу для свиней, о чем свидетельствует возникновение заболевания в 1972 г. в одном свиноводческом хозяйстве на острове Сахалин.

Известны калицивирусы, которые связаны с системными заболеваниями. Например, энтеритный калицивирус крупного рогатого скота и энтеритный калицивирус свиней вызывают диарею и анорексию сооответственно у телят и поросят. Калицивирус кур вызывает у цыплят остановку роста и высокую смертность. Калицивирус приматов (Panl) вызывает персистентную инфекцию и образование везикул. Калицивирусы человека вызывают диарею, обезвоживание, лихорадку, колики и недомогание. Один вирус связан с везикулярными поражениями гениталий собак. Известны калицеподобные вирусы. Так, например, из содержимого кишечника поросят с признаками диареи выделен вирус, сходный с калицивирусами. Клетками-мишенями его были эпителий ворсинок тонкого отдела кишечника поросят. Вирус антигенно отличался от возбудителя ВЭС. Калицивирусы легко идентифицируются в РН и методом перекрестного иммунитета.

Род везивирусы, кроме вируса ВЭС (13 серотипов), включает вирусы морских львов Сан Мигель (17 серотипов), калицивирус кошек, калицивирус китовых (Тиг-1), калицивирус приматов ( Рап-1) и калицивирус рептилий (Сго-1).

Род лаговирусы представлен вирусом геморрагической болезни кроликов и вирусом, вызывающим синдром коричневой печени европейских зайцев.

В 2000 г. принята современная классификация норовирусов, в основе которой лежит филогенетический анализ участка гена, кодирующего белок капсида размером 283 пн и аминокислотной последовательности размером 94 аминокислот, соответствующей данной области генома. В соответствии с предложенной классификацией норовирусы разделяются на 3 генотипа. В отличие от норовирусов генотипов 1 и 2, патогенных для человека, норовирусы генотипа 3 вызывают заболевания только у крупного рогатого скота и характеризуются меньшей вариабельностью генома. Вирусы генотипа 1 обнаружены у людей, генотипа 2 - у людей и свиней. Недавно был выделен норовирус мышей (Murine Norovirus-1).

Саповирусы являются вторым патогенным для человека родом семейства и характеризуются более высокой консервативностью генома по сравнению с норовирусами. Согласно последней классификации саповирусов, основанной на филогенетическом анализе нескольких участков генома, выделяют 3 генотипа саповирусов. Только генотипы 1 и 2 саповирусов патогенны для человека. Генотип 3 саповирусов (porcine enteric calicivirus — PEC) поражает желудочно-кишечный тракт свиней и в отличие от других сапо- и норовирусов способен репродуцироваться в культурах клеток in vitro. Имеется предположение о способности калицивирусов образовывать рекомбинанты.

Сведения, накопленные за последние 20 лет, показали, что кальцивирусная инфекция у людей является широко распространенным заболеванием, поражающим преимущественно детское население. Кальцивирусная инфекция человека выявлена во всех странах мира, где проводились исследования: США, Великобритании, Японии, России, Франции, Швеции, Китае и др.

Многие известные на сегодня калицивирусы млекопитающих, птиц и человека, в том числе вирус гепатита Е, входят в состав семейства, но пока не определена их родовая принадлежность.

Вирионы представляют собой безоболочечный нуклеокапсид кубической симметрии диаметром 35-40 нм. Они содержат 180 идентичных молекул белка (м. 60 000), собранных в димеры, формирующие 90 дугообразных структурных единиц, которые образуют 32 чашеобразных поверхностных углублений, придающих вирионам уникальный вид. На проекции вириона видны 10 выступов, представляющих собой края чашеобразных углублений. Обычно принятое понятие о капсомерах считается неприемлемым для калицивирусов.

Некоторые изоляты калицивирусов, вызывающие энтериты (Норфолк-вирусы), теряют характерную поверхностную структуру и приобретают вид пушинок, получившие название «мелкие круглые структурированные вирусы» (SRSV).

Структурные белки составляют 82% массы вириона. В вирионе находятся один главный и один минорный полипептиды. Кроме того, имеется один небольшой полипептид (VPg), играющий важную роль в инфекционности и ковалентно связанный с вирионной РНК. Молекулярная масса этих белков соответственно составляет 60-70, 15-19, 10-15 кД. На долю минорного полипептида приходится около 2% массы всего капсидного белка. Не исключается, что этот полипептид является клеточным компонентом. В вирионе содержится 180 молекул главного и, по-видимому, 12 молекул минорного полипептида.

Геном представлен одной молекулой линейной, одноцепочечной РНК, размером 7,4—7,6 пн. 5'-конец генома кэппирован ковалентно связанным белком VPg, а 3'-конец полиаденилирован. Геномная РНК и несколько субгеномных РНК образуются в процессе репликации; зрелые белки образуются двумя путями расщеплением полиопротеина и трансляцией субгеномных мРНК. Геномная РНК инфекционна. Вирусы относительно устойчивы к нагреванию и детергентам, но чувствительны к низким рН (>99% инактивируются при рН=3,0).

Калицивирусы размножаются в цитоплазме. Вирусы везикулярной экзантемы свиней и калицивирус кошек хорошо размножаются с ЦПЭ в культурах клеток естественных хозяев и в некоторых перевиваемых линиях клеток. Однако некоторые калицивирусы млекопитающих плохо размножаются или не размножаются in vitro.

Три открытые рамки считывания (ОРС) кодируют структурные и неструктурные белки, которые являются предшественниками структурных белков, ферментами и факторами регуляции инфекционного процесса в зараженной клетке. К структурным белкам относятся геликаза, протеаза, полимераза (ОРС 1) и белок капсида (ОРС 2). ОРС 2 кодирует белок из 116 аминокислот неизвестной функции, который транслируется с 2400 по мРНК и, возможно, является капсидным белком.

Различные калицивирусы используют две различные схемы транскрипции. В качестве примера могут служить калицивирус кошек и вирус геморрагической болезни кроликов (ГБК). У последнего неструктурные и структурный белок кодируются одной ОРС, образуя единый полиопротеин, который расщепляется посттранскрипционно. Транскрипция калицивируса кошек и, вероятно, калицивируса ВЭС является результатом функционирования двух видов мРНК: одна соответствует целому геному, другая — субгеномному участку размером 2400 по. Последняя является бицистронной, кодирующей считывание фрагментов 2 и 3. Подобные разновидности РНК (7500 и 2200 по) различают у вируса ГБК. Неизвестно, где оба вида РНК расположены в одних или разных вирионах.

VPg белок (м. 10 000-15 000) связан с 5'-концом РНК обоих видов. Неструктурные белки 2С геликаза ЗС трипсиноподобная сериновая протеаза и ЗД полимераза подобны тем, которые обнаружены у пикорнавирусов. Индивидуальные неструктурные белки освобождаются из полипротеина специфическими вирусными протеазами каскадно подобно пикорнавирусам. Геномная РНК реплицируется посредством синтеза промежуточной (—)РНК.

Вирионы накапливаются в цитоплазме в виде аморфных или паракристаллических образований или характерных линейных структур, связанных с цитоскелетом. Вирионы освобождаются при лизисе клеток.

Род Calicivirus семейства Caliciviridae объединяет вирусы с «голым» кубическим капсидом диаметром 37-40 нм.

Геном калицивирусов образован молекулой +РНК. При негативно-контрастной микроскопии на поверхности вирионов обнаруживают 32 чашевидных вдавления, в связи с чем вирусы и получили своё название [от греч. kalyx, чаша].

Калицивирусы не размножаются в известных клеточных культурах, для их диагностики обычно используют метод иммунной электронной микроскопии.

Патогенные для человека виды калицивирусов вызывают гастроэнтериты и гепатиты. Помимо истинных калицивирусов в род включены вирус Норволк и возбудитель гепатита Е.

Возбудители гастроэнтеритов

Патогенез заболеваний обусловлен некротическими поражениями эпителия слизистой оболочки тонкой кишки калицивирусами, сопровождающимися развитием диа-рейного синдрома.

Инкубационный период калицивирусных гастроэнтеритов не превышает 1-2 сут; большинство авторов выделяют три основных типа поражений: заболевания с выраженной рвотой (обычно наблюдают в зимние месяцы, чаще у детей); эпидемические диареи (у подростков и взрослых) и гастроэнтериты (чаще у детей).

Калицивирусные гастроэнтериты сопровождают миалгия, головная боль; у 50% пациентов отмечают умеренную лихорадку. Диарейный синдром при калицивирусном гастроэнтерите протекает мягко — стул водянистый, без примеси крови. Через 7-10 сут наступает спонтанное выздоровление.

Лечение калицивирусных гастроэнтеритов симптоматическое; средства этиотропной терапии и специфической профилактики отсутствуют.

Вирус Норволк и сходные с ним вирусы

Вирус Норволк имеет один структурный белок и РНК, сходные по свойствам с таковыми у калицивирусов.

Вирус Норволк — представитель группы неклассифицированных возбудителей гастроэнтеритов. Обычно вирусам дают названия по месту их выделения — Норволк, Гавайи, Монтгомери Каунти, Таунтон, Сноу Маунтин, Саппоро и др.

Они представлены мелкими (24-40 нм в диаметре) круглыми вирионами. В развивающихся странах AT к вирусу Норволк выявляют у 40-50% взрослых и иногда у детей. Заражение обусловлено потреблением загрязнённой воды и еды (особенно моллюсков и салатов).

Инкубационный период инфекций вируса Норволк не превышает 1-2 сут. Заболевания проявляются рвотой, болями в животе, водянистой диареей, проходящими спонтанно в течение 12-60 мин.

Лабораторное выделение вируса Норволк обычно не проводят, хотя их можно выделить из испражнений пассажем на культуре клеток почек эмбриона человека.

Семейство калицивирусов

Семейство Caliciviridae (от лат. calex — чаша) включает в себя вирусы, вызывающие поражения живых организмов — от рыб до человека.

Представители семейства имеют безоболочечный вирион икосаэдральной симметрии. Диаметр вириона 27—40 нм. Характерной структурной особенностью капсида является наличие 32 чашеобразных углублений на месте пяти — и трехосных вершин. Плавучая плотность составляет в CsCl 1,33—1,41 г/см 3 , в глицерин-тартрате калия — 1,29 г/см 3 . Коэффициент седиментации S₂₀w 170—187S.

Геном вирусов представлен одной молекулой односпиральной, линейной позитивной полярности, инфекционной РНК. Размер ее составляет 7,4—8,3 kb (килобаз). Вирионы преимущественно состоят из одного мажорного капсидного протеина. Второй минорный структурный протеин обнаруживают только у вирионов вируса геморрагической болезни кроликов. Неструктурные протеины включают домены хеликазы 2С, цистеиновой протеазы 3С и РНК-зависимой PHK-полимеразы. Данных о наличии в составе вирионов липидов и углеводов нет.

Репликация происходит в цитоплазме; в инфицированных клетках идентифицировано два вида мажорных РНК с позитивной полярностью. Полноразмерная позитивная РНК служит матрицей для трансляции крупного полипротеина, который затем подвергается разрезанию на неструктурные протеины. Субгеномная позитивная РНК является матрицей для трансляции мажорного вирусного белка. В клетках, инфицированных некоторыми калицивирусами, обнаруживаются двуспиральные РНК, что свидетельствует об осуществлении репликации через промежуточные негативные формы цепей.

Калицивирусы инфицируют широкий спектр животных, включая лошадей, крупный рогатый скот, свиней, кроликов, кошек, скунсов, ластоногих, шимпанзе и человека.

Передача вируса происходит алиментарно, реже аэрозольно. Калицивирусы ассоциируются с рядом патологических процессов. У человека они обычно вызывают кратковременные гастроэнтериты, проявляющиеся тошнотой, рвотой, диареей, коликами и общим недомоганием.

Семейство калицивирусов включает 5 родов.

Род Lagovirus. Представлен вирусом геморрагической болезни кроликов, вызывающим эпизоотии с генерализованной инфекции, сопровождающейся некрозом печени, быстрой гибелью кроткой старше 3-месячного возраста.

Род Sapporo-likeviruses. Типовой вид —Sapporo virus. Вирусы данного рода вызывают вспышки гастроэнтеритов у человека.

Род Hepatitis E-like viruses. Типовой вид — Hepatitis Е virus (вирус гепатита Е). Вирус ассоциируется со случаями гепатита у людей в странах тропиков и субтропиков. В организме приматов и свиней обнаруживались антитела к этому вирусу.

Род Norwalk—like viruses. Типовой вид — Norwalk virus (вирус Норвалк). Штаммы данного рода образуют внутри семейства отдельную филогенетическую группу. Для подразделения вирусов данного рода на виды необходимы дополнительные характеристики.

Род Vesivirus. Включает в себя типовой вид — вирус везикулярной экзантемы свиней, а также калицивирус кошек, бычий кали цивирус. Кроме того, в группу неклассифицированных вирусов этого рода включены бычий энтерокалицивирус, калицивирус собак, а также калицивирус птиц.

У свиней, инфицированных вирусом везикулярной экзантемы свиней, клиническая картина часто неотличима от таковой при ящуре, т. е. включает появление везикул во рту, на языке, губах, носовом зеркале, конечностях. Кроме того, инфекция может сопровождаться развитием энцефалита, диареей, абортами.

Калицивирус кошек ассоциируется с появлением у них конъюнктивита, ринита, пневмонией, везикулярным поражением слизистых, диареей, парезами и может вызвать развитие персистентной инфекции с сохранением вируса в миндалинах.

Большинство членов данного рода хорошо накапливаются в культурах клеток, что отличает их от представителей других трех родов калицивирусов, которые не культивируются ни в одной обычной культуральной системе.

Калицивирусы имеют признаки, общие с представителями семейств Picoma-, Poly — и Comoviridae.

Читайте также: