Отбор материала для микробиологического исследования. Забор материала для микробиологических исследований. Материал для микробиологического исследования.
Обновлено: 15.05.2024
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения
Тюменской области "Областная клиническая больница №1"
Нам доверяют самое ценное!
Правила взятия, доставки биологических материалов для основных микробиологических исследований в лаборатории клинической микробиологии
Правила взятия, доставки биологических материалов для основных микробиологических исследований в лаборатории клинической микробиологии
- производят в стерильные пробоотборники (пробирки, контейнеры, флаконы и др. посуду) до начала антибактериальной терапии;
- доставляют с соблюдением сроков доставки (без транспортных сред) не позднее 2 часов с момента взятия, без переохлаждения.
ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ.
Взятие материала производит процедурная медицинская сестра в кабинете или палате с соблюдением асептики во время подъема температуры тела (37,2-380С) во флаконы с питательной средой.
Подготовка флаконов: визуально убедиться в целостности флакона и пробки, защитного колпачка; в прозрачности бульона, проверить цвет сенсора (сенсор должен быть голубовато-зеленый или серый, но не желтый; при наличии желтой окраски флакон не используется).
Удалить защитный колпачок, продезинфицировать пробку 70%-ым раствором спирта или раствором йода, дать высохнуть перед контактом с иглой.
Подготовка кожи: обработать место венепункции 70% раствором спирта в течение не менее 30 секунд. Затем нанести на кожу вокруг места венепункции 1-2% раствор йода концентрическими кругами (диаметр зоны обработки - около 3-5 см). Продолжительность обработки - не менее 30 секунд. Если используется раствор спирта, время обработки - не менее 60 секунд. Дать коже высохнуть перед венепункцией. Не пальпировать вену после обработки. При необходимости пальпации использовать стерильные перчатки.
Произвести венепункцию, используя шприц, набрать необходимое количество крови.
Внести во флаконы необходимое количество крови в соответствии с инструкцией (для флаконов SA, SN, FA, FN рекомендуется вносить до 10 мл); PF (педиатрические аэробные) - от 0,5 до 4 мл крови.
При использовании шприца на 20 мл рекомендуется сначала внести кровь в анаэробный флакон, затем - в аэробный.
Не проталкивать кровь во флакон принудительно при помощи поршня - жидкость легко поступает во флакон, поскольку в нем отрицательное давление воздуха (вакуум). В вечерние и ночные часы, в воскресенье флаконы с кровью помещать в термостат на 350С или хранить при комнатной температуре до утра. В направлениях дополнительно указывать температуру тела в момент взятия крови.
ИССЛЕДОВАНИЕ СОСУДИСТЫХ КАТЕТЕРОВ.
Взятие материала производит врач.
Область кожи вокруг катетера обрабатывают тампоном с 70% спиртом. В условиях асептики извлекают катетер и стерильными ножницами отрезают 5 см дистального конца катетера в стерильную пробирку или флакон.
При невозможности доставить в течение 2 часов рекомендуется хранить при +40С до 24 часов.
ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ.
Взятие материала производит пациент. У лежачих пациентов - медицинская сестра.
Собирается моча после туалета наружных половых органов утренняя (накопительная) средняя порция мочи в количестве 3-5 мл. Катетеризация не рекомендуется.
При наличии постоянного катетера необходимо: пережать трубку ниже уровня отверстия уретры на 1-3 см, продезинфицировать трубку спиртовым тампоном и с помощью шприца с иглой взять до 5 мл мочи в стерильный пробоотборник (контейнер), снять зажим с катетера.
Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
При уретрите, цистите - доставляют первую порцию мочи.
ИССЛЕДОВАНИЕ МОКРОТЫ.
Взятие материала производит пациент под контролем медицинской сестры.
Перед взятием почистить зубы, прополоскать рот свежей кипяченой водой. Утреннюю (накопительную) мокроту без слюны в количестве 1-5 мл собрать в прозрачный контейнер. Доставлять не позднее 2 часов с момента забора.
ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОМЫВНЫХ ВОД БРОНХОВ.
Взятие материала производит врач.
В стерильную пробирку - в количестве до 3-5 мл. Доставлять в течение 2 часов с момента взятия.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО НОСА.
1. При ЛОР заболеваниях. Взятие материала производит врач.
Достовернее пунктат из пазух носа в шприце или стерильной пробирке (менее информативно) - стерильным ватным тампоном из средних (по показаниям - глубоких) отделов, предварительно освободив нос от слизи.
2. На носительство золотистого стафилококка. Взятие материала производит обученный медицинский персонал. Из передних отделов слизистой полости носа одним тампоном из обоих носовых ходов, не касаясь кожи носа. Доставлять в течение 2 часов с момента взятия.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ЗЕВА.
Взятие материала производит врач или обученный медицинский персонал.
Натощак или через 2 часа после приема пищи, жидкости. Необходимо хорошее освещение, корень языка придавить шпателем. Не касаться слизистой рта, языка!
1. На микрофлору, на носительство золотистого стафилококка - ватным тампоном обтереть слизистую правой миндалины, дужки, язычка, левой миндалины, задней стенки глотки. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
2. На возбудителей дифтерии - из зева: при наличии налетов на границе здоровой и пораженной ткани. При отсутствии налетов - как на микрофлору. Одновременно - из носа: отделяемое слизистой носа тампоном из обоих носовых ходов.
При подозрении на дифтерию (по цито) - 2 или 3 тампона из зева для прямой бактериоскопии, постановки опыта на токсигенность, посева. По показаниям - из мест редкой локализации: отделяемое глаз, уха, ран, другое. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия. В вечерние и ночные часы, воскресенье материал опускать в теплую среду обогащения или транспортную среду с активированным углем, хранить в термостате +350С или комнатной температуре до утра.
3. На менингококк - взятие с посевом у постели больного или в лаборатории производит медицинский лабораторный техник с задней стенки носоглотки ватным тампоном, изогнутым под углом 45о в нижней части его длины о пробирку. Доставка немедленно в теплом контейнере!
4. На коклюш - взятие с посевом у постели больного или в лаборатории производит медицинский лабораторный техник изогнутым ватным тампоном под углом 45о (тампон вниз) с задней стенки глотки Доставка немедленно в теплом контейнере!
5. На микоз (грибы) - ватным тампоном с пораженных участков слизистой. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИКВОРА.
Взятие материала производит врач.
С соблюдением асептики брать последние порции ликвора в количестве 1-3 мл в стерильную пробирку (края пробирки обжечь до взятия и после над спиртовкой). Доставлять немедленно в теплом пенале. Вне часов работы лаборатории - помещать в термостат на 35°С до утра.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО РАН.
Взятие материала производит врач, перевязочная медицинская сестра.
РАНЫ ПОВЕРХНОСТНЫЕ: во время перевязки кожу вокруг раны предварительно обработать раствором антисептика; некротические массы, детрит, гной удалить стерильной салфеткой. Взятие материала производить последовательно двумя ватными тампонами круговыми вращательными движениями от центра к периферии. Один тампон - для бактериоскопии, второй - для посева. По Cito! - 3 тампона: для бактериоскопии, посева и постановки чувствительности к антибиотикам.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ГЛАЗ.
Взятие материала производит врач.
За 5-6 часов до взятия отменить все процедуры и манипуляции. Раздельно из каждого глаза ватным тампоном со слизистой конъюнктивы от наружного к внутреннему краю, не касаясь кожи. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО УШЕЙ.
Взятие материала производит врач.
При поражении наружного уха обработать кожу 70° спиртом с последующим промыванием физиологическим раствором натрия хлорида. Затем отделяемое из очага взять ватным тампоном.
Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
При поражении среднего, внутреннего уха доставляют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств, собранный в стерильную посуду.
Вне часов работы лаборатории материал берется в среду обогащения или коммерческие накопительные среды (Амиеса, тиогликолиевая и др.) и хранится в термостате при 35' С или комнатной температуре в течение 24-48 часов (см. раневое отделяемое).
ИССЛЕДОВАНИЕ ЖЕЛЧИ.
Взятие материала производит процедурная медицинская сестра.
При зондировании после взятия желчи в клиническую лабораторию порции в стерильные пробирки в количестве 3-5 мл (чаще исследуется порция В, реже - порция С), либо во время операции с помощью шприца, соблюдая правила асептики. Доставлять в течение 2 часов.
ИССЛЕДОВАНИЕ ГРУДНОГО МОЛОКА.
Взятие материала производит пациентка под контролем медицинской сестры.
С соблюдением правил асептики, после туалета молочных желез, предварительно сцедив первые капли в салфетку. Доставлять в стерильных пробоотборниках (контейнерах) в количестве 1-3 мл в течение 0,5-1 часа.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ.
Взятие материала производит врач.
1. НА НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ВОЗБУДИТЕЛИ:
«С» канал - ватным тампоном в зеркалах до мануального исследования предварительно обработав влагалищную часть ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором натрия хлорида, не касаясь стенок влагалища.
Вульва - до манульного исследования, после введения зеркала и подъемника брать ватным тампоном с патологически измененных участков.
Отделяемое уретры - после туалета наружных половых органов брать ватным тампоном, не касаясь кожи.
Доставлять в течение 2 часов с момента забора.
По показания параллельно с взятием материала врач-гинеколог (врач-уролог) готовит препараты («мазки») на предметном стекле, используя отдельные стерильные ватные тампоны или гинекологические инструменты, равномерно распределяя материал без грубого втирания и резких штриховых движений.
2. НА МИКОПЛАЗМОЗ, УРЕАПЛАЗМОЗ - посев материала (соскоб из уретры, заднего свода влагалища, канала шейки матки) в пробирки осуществляют ложкой Фолькмана или тампоном однократного применения. Пробирки доставляют в лабораторию не позднее 2 часов с момента взятия.
- у мужчин отделяемое слизистой берут петлей или ложкой Фолькмана из глубины уретры, предварительно очистив отверстие тампоном, смоченным изотоническим раствором хлорида натрия. При малом количестве выделений до взятия материала производят массаж уретры в дистальном направлении. При заболевании предстательной железы исследуют ее сок.
- у женщин из шейки матки материал берут после введения во влагалище зеркала Куско. Шейку вытирают, удаляют наружную слизисто - гнойную пробку (вагинальный конец) и из отверстия шейки матки корнцангом или вагинальным пинцетом берут вязкую слизь.
- у мужчин отделяемое слизистой оболочки берут петлей или ложкой Фолькмана из глубины уретры, предварительно очистив отверстие тампоном, смоченным изотоническим раствором хлорида натрия. При малом количестве выделений до взятия материала производят массаж уретры в дистальном направлении. При заболевании предстательной железы исследуют ее сок.
- у женщин из шейки матки материал берут после введения во влагалище зеркала Куско. Шейку вытирают, удаляют наружную слизисто-гнойную пробку (вагинальный конец) и из отверстия шейки матки корнцангом или вагинальным пинцетом берут вязкую слизь (для беременных женщин взятие из экзоцервикса), не допуская загрязнение исследуемого материала микрофлорой влагалища.
ИССЛЕДОВАНИЕ ИСПРАЖНЕНИЙ.
Взятие материала производит медицинская сестра.
1. На патогенные энтеробактерий (шигеллы, сальмонеллы, эшерихий) - из судна без следов дезинфицирующих растворов брать слизь, зелень, фекалий в стерильную посуду или в пробирку с транспортными средами (глицериновый консервант, Кэри-Блейра или другие коммерческие накопительные среды) в объеме не более 1/3 от среды.
Нативный фекалий (без транспортной среды) - доставлять в течение 2 часов с момента взятия.
Вне часов работы лаборатории хранить в холодильнике +40С в глицериновом консерванте до 16-24 часов, среде Кэри-Блейра и других коммерческих средах - до 48 часов.
2. На дисбактериоз, грибы, патогенный стафилококк, УПМ (условно-патогенную микрофлору), иерсинии - из судна с соблюдением асептики 1-2 г нативного фекалия в стерильные контейнеры с лопаточкой. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
3. На возбудителей холеры - 0,5-1,5 г нативный фекалий (доставлять не позднее 2 часов с момента взятия), при невозможности доставить в требуемые сроки - в холерный консервант (хранить в термостате 350С до 6 часов).
4. На выявление антигенов лямблий; хеликобактера; рота-, нора- и аденовирусов, токсинов клостридий иммунохроматогенным методом (экспресс-метод) - нативный фекалий 0,5-1,5 г в чистой стеклянной посуде.
Каждая проба сопровождается документом - направлением, где указывают: фамилию, имя, отчество пациента; год рождения; отделение, в котором он находится; номер истории болезни (амбулаторной карты); диагноз; материал, посылаемый на исследование, и задачи исследования; дату и время взятия материала; антибактериальные (иммунные) препараты, если проба берется на фоне антибиотико- и/или иммунотерапии; фамилию, имя, отчество лечащего врача (консультанта), направляющего пробу на исследование.
Часы работы лаборатории клинической микробиологии: с 8.00 до 15.30 часов, в субботу - с 8.00 до 14.00 часов, выходной - воскресенье.
Амбулаторные пациенты исследуемый материал доставляют самостоятельно на 9 этаж административного корпуса больницы.
Из отделений материал доставляется в оперативный отдел.
Тема № 10. Отбор, консервирование, транспортировка и хранение материала для микробиологического исследования.
Общие требования к отбору патматериала для исследования. Материал берут с учетом клинических признаков болезни, которые указывают на поражение той или иной системы организма, патологоанатомической картины при вскрытии (изменения в различных органах - печени, легких, кишечнике и т.д.),а также основываясь на предполагаемом диагнозе (для каждой инфекции характерна определенная локализация возбудителя в организме). *При массовых падежах или заболеваниях необходимо отбирать материал от нескольких животных.
Материал для исследования берут прижизненно или посмертно (от павших или убитых с диагностической целью животных). Во всех случаях желательно материал брать от животных, не подвергавшихся лечению антибиотиками, и в максимально короткие после их гибели сроки, так как через 2 - 3 ч после смерти нормальная микрофлора начинает проникать в органы и ткани, затрудняя выделение возбудителя в виде чистой культуры. Чтобы избежать контаминации посторонней микрофлорой, исследуемый материал берут с использованием стерильного инструмента и посуды для транспортировки.
Для бактериологического исследования патологический материал (органы или их части) консервируют 30% водным раствором химически чистого глицерина. Материал можно консервировать также в стерильном вазелиновом масле. Материал заливают консервирующей жидкостью в количестве, в 4-5 раз превышающем его объем.
Материал, направляемый для вирусологических исследований, консервируют 30-50% раствором химически чистого глицерина на физиологическом растворе поваренной соли.
Кровь, гной, слизь, экссудат, мочу, желчь и другой жидкий патматериал для бактериологического и вирусологическогоисследований посылают в запаянных пастеровских пипетках, стерильных пробирках или во флаконах, хорошо закрытых стерильными резиновыми пробками; для микроскопического исследования (для обнаружения в них микробов, кровепаразитов и для определения лейкоцитарной формулы) в виде мазков.
Прижизненный отбор материала для исследования. Секрет молочной железы. Сосок обмывают водой, обрабатывают ватными тампонами, смоченными этанолом (70%). Первые порции молока сливают, последующие сцеживают в стерильные пробирки, транспортируют при 4 С, исследуют в течение 3 часов после взятия.
Материал при инфекциях дыхательных путей. При отборе материала с поверхности слизистой носа стерильный ватный тампон вводят в носовой ход, вращательными движениями собирают материал со слизистой. Для взятия материала из зева шпателем прижимают язык, стерильным тампоном собирают материал с миндалин, задней поверхности глотки. При поражении нижних дыхательных путей наиболее доступна для исследования мокрота, которую собирают до приема корма. Из трахеи материал берут при помощи стерильного трахеотубуса и стерильного ватного тампона на проволоке. При глубоком (до бифуркации) введении тампона возникает кашель и удается получить бронхиальную слизь. Тампон с материалом помещают в пробирку со стерильным физиологическим раствором. Сроки доставки мокроты в лабораторию не более 2 часов.
Материал при инфекции глаз. Материал с конъюнктивы берут увлаженным ватным тампоном вращательными движениями. При получении соскобов с роговицы предварительно закапывают 1-2- капли анестетика, делают 3-4 соскоба с изъязвленных участков роговицы. Внутриглазную жидкость берут путем пункции передней камеры глаза. Материал транспортируют в лабораторию в закрытом шприце или транспортной среде.
Отбор материала при наружном отите. Кожу обрабатывают этанолом (70%), промывают стерильным физиологическим раствором, материал берут стерильным ватным тампоном. Предпочтительнее исследовать содержимое проксимальной части горизонтального канала, в этом случае контаминация образца микроорганизмами, не являющимися причиной отита, минимальна. Для этого в ухо осторожно вводят пластиковую воронку от отоскопа, а в её просвет, не касаясь стенки вертикального канала, вводят тонкую ватную палочку. Ватную палочку прокатывают по чистому обезжиренному предметному стеклу. Всегда подвергают исследованию материал из обоих ушей, даже в случаях одностороннего отита. Отдельно исследуется материал из левого и правого уха, для этого можно использовать разные концы предметного стекла, предварительно подписав их.
Кровь. Волос у животного на месте взятия крови выстригают, кожу тщательно протирают тампонами со спиртом (70%), затем смазывают настойкой йода. Кровь забирают в стерильные пробирки (стекает по стенке пробирки) или на предметные стекла (первую каплю крови удаляют) в зависимости от задачи исследования.
Жидкость из стерильных полостей (плевральная, перитонеальная, суставная). Кожу в области пункции выбривают и обрабатывают этанолом (70%). Материал берут при помощи стерильного шприца.
Моча. На сегодняшний день выделяют три основных способа сбора материала: при помощи катетера; при проколе мочевого пузыря (цистоцентез); естественным путем. При катетеризации в уретру вводится уретральный катетер, который делает прохождение мочи беспрепятственным. При помощи шприца осуществляется забор необходимого материала (высокий риск контаминации уретры и материала). Прокол мочевого пузыря (цистоцентез) место прокола подготавливается с соблюдением правил асептики и антисептики. Сбор мочи при естественном процессе мочеиспускания -наружные половые органы обмывают водой, ополаскивают физиологическим раствором, осушают стерильной марлевой салфеткой. Первую порцию мочи не берут, последующую помещают в стерильную посуду.
Взятие материала из половых органов. Вагинальное отделяемое забирают при помощи стерильного ватного тампона. Материал от самцов получают в виде препуциальных смывов. Предварительно проводят санитарную обработку препуция, затем в препуциальную полость вводят необходимое количество физиологического раствора и массируя препуций при помощи шприца забирают смывную жидкость.
Посмертный отбор материала. Органы и ткани. Поверхность органа на месте разреза обжигают пламенем спиртового тампона или прижигают раскаленным металлическим шпателем. Фрагменты органа (ткани) вырезают при помощи стерильных ножниц (скальпеля), помещают в стерильную стеклянную посуду, укупоривают.
Трупы мелких животных направляют в лабораторию целиком.
Кишечник. Выбирают участки с наиболее выраженными поражениями. Если исследуют содержимое кишечника, то пересылают отдельные отрезки (сегменты) кишечника, перевязанные на концах лигатурами. В остальных случаях интересующие отрезки кишечника освобождают от содержимого, промывают стерильной водой и помещают в банку со стерильным 30% водным раствором глицерина или насыщенным раствором хлорида натрия. Кишечник отправляют в лабораторию вместе с регионарными лимфатическими узлами.
Трубчатые кости посылают на исследование в целом виде, с неповрежденными концами, тщательно очистив их от мышц и сухожилий. Кости завертывают в марлю или полотно, смоченное дезинфицирующей жидкостью (5% раствором карболовой кислоты). Кости можно также посыпать поваренной солью и завернуть в полотно или марлю.
Упаковка и пересылка патматериала. Трупы мелких животных, части трупов крупных животных и отдельные органы в свежем (нефиксированном) виде отправляют для исследования в лабораторию только с нарочным. Посылаемый материал, особенно от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, должен быть тщательно упакован в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предупредить возможность рассеивания инфекции в пути. Перед упаковкой материал необходимо завернуть в холст или мешковину, смоченную дезинфицирующим раствором (фенольного креолина, лизола, известкового молока), и уложить в ящик со стружками, мякиной или опилками.
Части органов, жидкости, отправляемые в лабораторию почтой в фиксированном или консервированном виде, должны быть помещены в герметически закупоренную стеклянную посуду с притертой стеклянной, пластмассовой, резиновой или корковой пробкой. Пробка должна быть закреплена проволокой или бечевкой и залита менделеевской замазкой (сургучом, смолкой, парафином или воском), чтобы укупорка была непроницаемой для жидкости. Укупоренную посуду вкладывают в прочный плотный ящик и хорошо обкладывают ватой, паклей, стружками, опилками или другими упаковочными материалами.
Кости обертывают целлофаном, полиэтиленовой пленкой или смоченными в дезрастворе марлей или полотном и также упаковываются в ящики.
При пересылке почтой или с нарочным патологического материала от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, или явно инфицированного материала упаковка должна гарантировать доставку материала в целости и исключить возможность рассеивания возбудителей инфекции. На лицевой стороне посылки вверху должна быть надпись "Осторожно - стекло" и "Верх".
Стеклянную посуду, в которой заключен посылаемый материал с подозрением на наличие особо опасных болезней (сап, сибирская язва, эмфизематозный карбункул, бруцеллез, туляремия, перипневмония крупного рогатого скота, чума крупного рогатого скота, чума свиней, псевдочума птиц, ящур, бешенство), обязательно упаковывают в металлическую коробку, которую запаивают, пломбируют, или опечатывают, а затем упаковывают еще в деревянный ящик.
Если такой материал доставляют с нарочным, можно отправлять его в стеклянной, герметически закупоренной посуде, без металлической коробки, но в деревянном ящике.
На взятый патологический материал составляют сопроводительный документ. Если при вскрытии посылки в лаборатории будут установлены несоответствие сопроводительному документу или порча патологического материала, об этом обязательно составляют акт, копию которого отправляют ветеринарному врачу, направившему материал в лабораторию.
Рекомендуем для прочтения:
Понятие о статистическом наблюдении, этапы его проведения Тема 2. Статистическое наблюдение 1. Понятие о статистическом наблюдении.
Виды лексических ошибок 1. Употребление слова в несвойственном ему значении: Старцев гарцует на бричке с ленивым кучером. (Гарцевать можно только верхом на.
Оформление подпрограмм в блок-схемах алгоритмов Блок-схема алгоритма подпрограммы изображается аналогично блок-схемам программ.
Режим холостого хода трансформатора Определение режима. Холостым ходом трансформатора называется такой режим его работы.
Учение Аристотеля о 4 начала/причинах сущего. В соответствии с учением о сущности, Аристотель проводит классификацию причин бытия.
ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
Вид исследуемого материала зависит от цели исследования. При микробиологической диагностике клинический материал забирается из организма больного и/или носителя, при проведении эпидемиологического анализа - дополнительно исследуются пробы из объектов внешней среды (воды, воздуха, почвы, продуктов питания, смывы с предметов, инвентаря).
Для качественного проведения лабораторной диагностики важное значение имеет правильное взятие материала, правильное приготовление мазков и производство посева. Посев от каждого больного должен сопровождаться одновременно приготовлением двух мазков из того же очага, откуда сделан посев. Качество окраски мазков в значительной степени зависит и от их приготовления: материал в мазках должен быть расположен равномерным, тонким слоем, но в то же время содержать достаточно материала для исследования.
Выделения, жидкости и ткани организма (гной, мокроту, кровь, испражнения, рвотные массы, мочу, содержимое полостей зева и носа, промывные воды бронхов и желудка, ликвор, выделения из половых органов, трупный материал), содержащие наибольшее количество возбудителя. В каждом случае учитывают особенности предполагаемой инфекции, место максимальной локализации возбудителя и пути его выделения в окружающую среду. Материал для исследования берут, соблюдая правила асептики. Для повышения качества лабораторной диагностики необходимым условием является взятие материала до начала антимикробной терапии или после 1-2 суточного перерыва в ней. Игнорирование этого обстоятельства может обусловить отрицательные результаты исследования.
Гной, серозно-гнойный экссудат(внеклеточную жидкость, накапливающуюся в тканях или серозных полостях), некротические массы берут из закрытых очагов пункцией шприцем, из открытых - пипеткой, шприцем, сухим тампоном, ложечкой Фолькмана, желательно из глубины патологического очага, после очистки от поверхностных масс. Гной лучше брать в пробирку с МПБ, можно просто в стерильную пробирку, в количестве 1 мл (при подозрении на анаэробную инфекцию желательно взять 8-15 мл). Из гноя сразу же делается мазок и посев во избежание лизиса бактерий.
Слизь из зева и носа исследуют при подозрении на дифтерию, менингококковую инфекцию, ангину, коклюш или другие респираторные заболевания. Материал берут стерильным тампоном.
Мазок из зева берут натощак или не ранее, чем через 2 часа после полоскания, питья или еды под визуальным контролем с использованием шпателя. Корень языка придавливают книзу и кпереди шпателем, держа его левой рукой, а правой рукой осторожно вводят в ротовую полость тампон и снимают налёт, не касаясь тампоном слизистых оболочек рта, языка, зубов. Лучше всего снять налёт или слизь на границе поражённого участка, где возбудителей больше и жизнеспособность их выше.
Перед взятием слизи из носа необходимо предложить больному высморкаться или очистить нос сухим ватным фитилем и удалить корки. Тампон вводят в каждую ноздрю, плотно прикасаясь всеми сторонами его к стенкам и перегородке носа. Полученный материал с тампона немедленно высевают на плотные питательные среды, а также наносят на предметное стекло, подсушивают и направляют в лабораторию.
Мокроту забирают на раннем этапе болезни, утром, натощак. Если мокроты выделяется мало, секрецию её можно усилить ингаляцией тёплого гипертонического или щелочного раствора, назначением бронхолитиков. Для снижения контаминации мокроты микрофлорой глотки и полости рта их многократно прополаскивают стерильной водой или физраствором. После этого больной откашливает мокроту в стерильную банку и сразу же закрывает её стерильной крышкой.
При поступлении на исследование мокроты особое внимание следует обратить на оценку качества доставленного образца. Критериями пригодности мокроты для бактериологического исследования является наличие более 25 сегментоядерных лейкоцитов и не более 10 эпителиальных клеток в поле зрения при просмотре, как минимум, 20 полей зрения мазка, окрашенного по Граму.
Промывные воды бронхов (бронхо-альвеолярный лаваж)забирают (при отсутствии мокроты или параллельно с ней) специально или в сочетании с лечебными процедурами. Больной тщательно ополаскивает глотку и полость рта стерильной водой или физраствором. Под контролем гортанного зеркала в дыхательные пути вводят 4 мл физраствора. Откашливаемое содержимое собирают в стерильные широкогорлые банки.
Кровьисследуют при отсутствии или неясности локальных очагов, исследование лучше проводить в начале болезни или в разгаре. При транзиторной бактериемии выявить возбудителя в крови с помощью бакпосева иногда не удаётся. Для повышения выявляемости возбудителя кровь следует брать во время озноба или на высоте лихорадки. Следует помнить, что озноб и лихорадка - наиболее частые явления, побуждающие к выделению гемокультуры, обычно запаздывают на 30-90 мин по отношению к эпизоду бактериемии, поэтому исследование должно проводиться неоднократно.
Чтобы избежать влияния бактерицидных свойств крови, её необходимо разводить большим количеством среды, примерно в соотношении 1:10. Обычно берут 10 мл крови и засевают в 90 мл жидкой среды (сахарный, сывороточный или желчный бульон). Среда выбирается в зависимости от биологических особенностей возбудителя предполагаемой инфекции. Переливать кровь из шприца во флакон с питательной средой надо над пламенем спиртовки, предварительно сняв иглу. Посев отправляют в лабораторию, вечером и ночью его помещают в термостат. При отсутствии питательной среды кровь берут в стерильную пробирку с соблюдением тех же правил.
Сыворотка или плазма крови для серологического исследования берется натощак. Накануне взятия крови необходимо исключить физические нагрузки, приём алкоголя, жирной пищи и психологические стрессы. За час до взятия крови исключается курение. Во время взятия обследуемый должен
находиться в положении сидя или лёжа.
Для серологического исследования достаточно 1 мл сыворотки (плазмы) или 2 мл крови.
Кровь берут в чистую, сухую, пластмассовую или стеклянную пробирку. При необходимости транспортировки отделяют сыворотку или плазму, которые тотчас замораживают. При постановке серологических реакций возможны повторные замораживания и оттаивания (дефростации) сывороток до 3 раз при хранении их при -20 0 С. После размораживания сыворотку или плазму следует тщательно перемешать.
При работе с кровью следует строго соблюдать рекомендации по предотвращению заражения ВИЧ и парентеральными вирусными гепатитами .
Ликвор(8-10 мл) берут при спинно-мозговой пункции в две пробирки: для биохимического анализа и для бактериологического исследования при подозрении на менингит, нейросифилис.
Рвотные массы собирают в стерильные банки с притёртыми крышками и нейтрализуют 10% Na2CO3.
Промывные воды желудка (20-50 мл) собираются в стерильную ёмкость после промывания желудка стерильным физраствором без добавления антисептиков (натрия гидрокарбоната, калия перманганата и др.).
Испражнения исследуют при подозрении на кишечные инфекции (брюшной тиф, паратифы А и В, дизентерию, сальмонеллёзы, эшерихиозы и др.). Испражнения (2-3 г) берут стерильным деревянным шпателем или стеклянной палочкой из судна, горшка или непосредственно из прямой кишки с помощью ватных тампонов, металлических петель или через трубку ректоскопа. В судне или горшке не должно оставаться следов дезинфектанта, для чего их необходимо тщательно промыть горячей водой. Нужно стремиться взять слизь, гной, фибринные плёнки и избегать примесей крови в связи с её бактерицидным действием. Взятие материала из rectum не зависит от числа дефекаций и может быть проведено в любой момент. Больного просят лечь на бок с приведёнными к животу бёдрами и ладонями развести ягодицы. Петля или тампон осторожным движением вводится в задний проход на глубину 5-6 см и также осторожно вынимается. Лучше всего сразу же сделать посев материала на питательную среду. Если это невозможно, материал с петли или тампона смывают в пробирку со стерильным физраствором и отправляют в лабораторию.
Желчь (10-20 мл) забирают во время дуоденального зондирования. В отдельные пробирки собирают все три порции желчи (А, В и С). Конец зонда предварительно обрабатывают спиртом, затем после выделения 1-2 мл желчи (для исследования не используется) наполняют пробирки непосредственно через зонд или с помощью стерильного шприца. При наличии кислой реакции (примеси желудочного сока), хлопьев, белесоватого оттенка жидкости материал считается непригодным.
Мочу (20-30 мл) собирают в стерильную, плотно закрывающуюся посуду при помощи стерильного катетера после предварительного обмывания половых органов с мылом и ополаскивания их стерильным физраствором.
У мужчин допустим сбор мочи при естественном мочеиспускании после туалета наружных половых органов. Для посева используется вторая порция мочи. Мочу, взятую при естественном мочеиспускании, засевают только на элективные среды.
Правила забора материала для микробиологических исследований
При заборе и работе с клиническим материалом персонал должен использовать перчатки и халат. При этом необходимо соблюдать ряд правил.
Кровь для посева следует брать из вены на высоте подъема температуры; Посев производится в жидкую элективную среду в соотношении 1:10.
Мочаздорового человека стерильна. От начала взятия пробы мочи до начала исследования в лаборатории должно проходить не более 1-2 часов.
Испражненияна патогенные энтеробактерии берут ректальными петлями, смоченными консервантом, и помещают в пробирку с консервирующей средой.
Слизь из носоглотки(на дифтерию) забирают стерильным тампоном натощак.
Спинно-мозговую жидкость получают в результате люмбальной пункции. 3-5мл ликвора помещают в пробирку (при транспортировке предохранять от охлаждения).
Мокроту собирают натощак после ополаскивания рта.
2)Транспортировкуполученного материала следует проводить в максимально короткие сроки (2-3 часа) в специальных биксах или пеналах.
3)Направлениеприлагается к клиническому образцу в качестве сопроводительного документа (см. практические навыки 1.4).
Правила забора материала и хранения при особо опасных инфекциях
К особо опасным инфекциям (ООИ), прежде всего, относится чума. При постановке предварительного диагноза «чума» в лаборатории проводятся срочные мероприятия:
1.Немедленно сообщают в вышестоящие органы здравоохранения.
2.На лабораторию накладывается карантин, т.е. ни один лабораторный работник, контактировавший с заразным материалом, не должен покидать помещения лаборатории до прибытия эпидемиолога.
3.Все материалы: от больных, чистые культуры и павшие животные должны быть направлены в специализированные лаборатории для окончательного установления диагноза.
4.Меры безопасности при транспортировке.
Материал помещают в банки с плотно закрывающейся пробкой, обвязывают пергаментом (т.е. водонепроницаемым материалом), затем обвертывают салфетками, смоченными 5% раствором лизола или фенола. В таком виде банки с материалом помещают в металлические биксы. На банки с материалом наклеивают этикетки. Все надписи на этикетке делают простым графитным карандашом, т. к. надписи чернилами смываются при дезинфекционной обработке.
5.После отправки материала проводят заключительную дезинфекцию.
Культуру автоклавируют при температуре 120 °С в течение 1 часа.
Стеклянную лабораторную посуду обеззараживают в 3% растворе хлорамина или карболовой кислоты 1 сутки, а затем кипятят в 1% растворе бикарбоната натрия.
Трупы животных автоклавируют, заливают 10% раствором лизола на сутки и закапывают в специально вырытую яму.
Кожу открытых частей тела обрабатывают 70% раствором спирта.
Оформление направления на микробиологическое исследование
Направление на исследование является сопроводительным документом, который прилагается к инфекционному материалу, предназначенному для лабораторных исследований.
Составляется по следующей форме:
1) название материала;
2) учреждение, направляющее материал;
3) фамилия, имя, отчество больного;
5) адрес обследуемого;
6) дата заболевания;
7) дата взятия материала;
8) предполагаемый клинический диагноз;
9) подпись врача, направляющего материал.
Поступивший в лабораторию инфекционный материал регистрируется в специальном журнале.
Дезинфекция в микробиологической лаборатории
Дезинфекция - это обеззараживание объектов окружающей среды с помощью химических веществ, обладающих антимикробным действием.
Цель дезинфекции- предупредить передачу возбудителей от инфицированного организма не инфицированному.
В микробиологической лаборатории используют:
1) хлорную известь (0,1 - 10% раствор);
2) хлорамин (0,5 - 5% раствор), для дезинфекции рук 0,25 - 0,5% раствор, для дезинфекции предметов ухода за больными при кишечных и воздушно-капельных инфекциях 1-3% раствор, при туберкулезе - 5% раствор;
3) фенол (карболовая кислота) в виде 3 - 5%раствора для дезинфекции помещений;
4) лизол (3 - 5% раствор);
5) биглюконат хлоргексидин (гибитан), для дезинфекции рук 0,5% раствор, для дезинфекции помещений 0,1% раствор;
6) дихлорид ртути (сулема) - иногда используют для дезинфекции предметов ухода за больными. Препарат высокотоксичен, всасывается через кожу;
7)этиловый спирт (70%), вызывающий коагуляцию белков микробов.
Самое популярное на сайте:
Основные понятия организации труда на предприятии Организация труда на предприятии Под организацией труда понимают приведение трудовой деятельности в определенную систему.
Примеры решения задач Пример 1. Определить температуру, при которой в проводнике вероятность найти электрон с энергией 0,5 эВ над уровнем Ферми равна.
Органы исполнительной власти субъектов РФ Органы исполнительной власти субъектов РФ - органы, образованные в соответствии с Конституцией РФ и законами субъекта РФ.
Городские парки, их классификация и назначение Общие положения Озелененные территории общего пользования условно подразделяются на три группы.
Алгоритм проведения лекарственного электрофореза Алгоритм проведения гальванизации 1. Ознакомиться с назначением врача. 2. Подготовить аппарат «.
Жертвенность, качество человека, говорящее о его самодостаточности! Человек, у которого проблемы с целостностью, не может давать. Он только принимает, думая, что это восполнит нехватку внутренних пустот. ==> читать все изречения.
Отбор материала для микробиологического исследования. Забор материала для микробиологических исследований. Материал для микробиологического исследования.
Отбор материала для микробиологического исследования (требования на преаналитическом этапе).
24 Августа 2016
Что такое микробиологическая диагностика (исследования)?
Цель микробиологических исследований - установить наличие или отсутствие возбудителя (бактерии, грибов, вирусов и др.) в организме пациента при гнойно-воспалительных инфекциях и на объектах окружающей среды; определить их количество (по показаниям). Есть ли агенты воспаления и сколько их?
Задачи микробиологических исследований - идентифицировать (расшифровать) микроорганизмов в исследуемом материале, определить их родовую и видовую принадлежность (узнать «фамилию» и «имя» возбудителя), а также определить чувствительность выделенных микроорганизмов к антимикробным препаратам. Чем же лучше лечить пациента?
Несмотря на то, что проведение микробиологических исследований относится к компетенции бактериологов (микробиологов), каждый врач, имеющий дело с инфекционными заболеваниями, должен знать, как и когда необходимо отбирать материал для исследований, на какие исследования его направлять и как интерпретировать полученные результаты.
Отбор материала для микробиологического исследования (требования на преаналитическом этапе).
Для проведения качественного микробиологического исследования важно правильно и грамотно выбрать материал для исследования.
При поражениях отдельных органов и систем целесообразно отбирать материал соответствующей локализации с учётом клинической картины заболевания и доступности материала для исследования.
Так, при лихорадке неясного генеза первоначально проводят посев крови; затем, при появлении симптомов более конкретных проявлений, например пневмонии, проводят взятие мокроты.
Выбор материала для микробиологического исследования должен соответствовать характеру инфекционного процесса. Так, например, при установлении возбудителя пневмонии материалом должна быть мокрота, а не слюна; при раневых инфекциях - отделяемое из глубины раны, а не с её поверхности; при инфекциях мочевыводящих путей - накопительная (ночная) средняя порция мочи.
Образцы материала для микробиологического исследования следует забирать до назначения антимикробной терапии, с соблюдением правил асептики для предупреждения загрязнения исследуемого материала в стерильные пробоотборники.
Материал доставлять необходимо без переохлаждения и с соблюдением сроков доставки. Если не используются транспортные питательные среды, то оптимальный срок доставки: не позднее 2 часов с момента взятия (подробная информация см. Правила взятия, доставки биологических материалов для основных микробиологических исследований в лаборатории клинической микробиологии» (извлечения из МУ 4.2.2039-05 "Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории").
- через 30 мин. при диагностике язвенной болезни (обнаружение антигенов H.pilori в фекалиях); кишечных инфекции вирусной этиологии (рота-, адено- и др. вирусы); лямблиоза экспресс иммуно-хроматогенным методом;
- через 24 часа при диагностике кишечных инфекций бактериальной этиологии: сальмонеллы, шигеллы, энтеропатогенные кишечные палочки (фекалий на бакпосев на «дизгруппу»);
- через 48 часов любой биологический материал (моча, мокрота, отделяемое ран, зева, глаз и др.) на микрофлору с определением чувствительности; фекалий на условно-патогенную микрофлору;
- через 72 часа - на возбудителей дифтерии, диагностике дисбактериоза кишечника и др.
Микробиологические методы исследований — «золотой стандарт» микробиологической диагностики.
Читайте также: