Полимеразная цепная реакция в стоматологии. Ценность ПЦР для стоматолога
Обновлено: 04.05.2024
Современная молекулярная диагностика в стоматологии. Ценность молекулярной диагностики
Внедрение в практику стоматологии современных молекулярных методов открывает новые перспективы в решении вопросов этиологии и патогенеза стоматологических заболеваний. Несомненно, возможность идентификации новых, малоизученных бактериальных форм, оказывающих влияние на развитие патологических процессов в тканях и органах челюстно-лицевой области, будет иметь существенное значение для решения насущных задач профилактики и лечения.
В настоящее время большинство ученых используют универсальные праймеры в попытках охарактеризовать все микробное сообщество. Однако необходимость создания праймеров, специфичных для микрофлоры ротовой полости, заставляет обратиться к методам культивирования. Ввиду объективных ограничений метода ПЦР и иммунохимического анализа требуется проверка получаемых праймеров и антител на чистой культуре микроорганизмов. Только после такой проверки можно уверенно применять новые препараты в диагностике пародонтита и других заболеваний ротовой полости.
При лечении пациентов с ВЗП нередко применяют антибиотики. Проблема выбора антибактериальных средств, контроля их эффективности, выявление резистентности микроорганизмов к назначенному лечению могут решаться посредством использования молекулярных методов. Поскольку зачастую в клинике антибактериальные препараты назначаются без должного учета всех факторов, задачу внедрения молекулярных методов исследования, в частности ПЦР, в клиническую стоматологию на сегодняшний день следует признать в высшей степени актуальной.
Применение методов молекулярной диагностики также способствует развитию исследований в области изучения генов устойчивости к антибиотикам. Так, ПЦР была использована для выявления локусов ДНК, ответственных за устойчивость к тетрациклину и эритромицину у анаэробных микроорганизмов (Fusobacterium, Prevotella, Porphyromonas). Местное назначение тетрациклина, по данным ряда авторов, может приводить к появлению в ПК бактерий, устойчивых к этому. Согласно Villedieu и соавт. (2002), примерно 11 % культивируемых организмов ротовой полости устойчивы к тетрациклину. Показано разнообразие генов устойчивости к тетрациклину в микрофлоре ротовой полости у взрослых здоровых лиц.
Интересные результаты были продемонстрированы этими авторами при исследовании образцов слюны и зубных бляшек, полученных от 20 здоровых взрослых, не принимающих антибиотики в течение предыдущих 3 мес. Было описано 8 классов генов устойчивости к тетрациклину, кодирующих рибосомный белок и найденных у Veilonella, Prevotella, Streptococcus, Staphylococcus, Streptomyces, Lactobacillus, Neisseria, Enterococcus. Гены устойчивости обнаружены как у грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов.
Гены устойчивости грамотрицательных микроорганизмов широко распространены по геному и связаны с большими плазмидами, большинство из которых способно перемещаться. Гены устойчивости грамположительных микроорганизмов обычно находятся на малых передающихся плазмидах. Показано, что некоторые бактерии (Neisseria, Haemophilus, Streptococcus) распространяют гены устойчивости к тетрациклину посредством транспозонов. В другом исследовании было обнаружено, что многие виды бактероидов несут большое количество новых самопередающихся хромосомных элементов с геном устойчивости к тетрациклину Тс. Некоторые элементы несут также ген устойчивости к эритромицину Tm. Эти элементы вставлены в хромосому бактероидов и передаются самостоятельно от хромосомы донора к хромосоме реципиента.
Следует признать, что изучение устойчивости у бактерий ротовой полости к различным антибиотикам в настоящее время является одним из приоритетных научных направлений.
Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.
Разработан новый ПЦР-тест для диагностики рака полости рта
Стремясь ускорить выявление и улучшить лечение рака полости рта, исследователи из Лондонского университета Королевы Марии разработали первый тест на полимеразную цепную реакцию (ПЦР) для выявления рака полости рта. Изобретатель, доктор Муй-Тек Тех, назвал этот тест Системой количественной диагностики злокачественных индексов (qMIDS). Помимо получения быстрых результатов, qMIDS является экономически эффективным и простым в использовании и может снизить нагрузку в медицинских службах.
По данным Национальной службы здравоохранения, рак полости рта занимает шестое место по распространенности в мире. Например, в Великобритании ежегодно выявляется около 8300 случаев рака полости рта. Хотя семь из десяти случаев начинаются с предраковых поражений, только один из десяти таких поражений перерастает в рак.
До сих пор исследователям не удавалось найти оптимальный способ выявления поражений, которые могут стать злокачественными. Один из методов заключался в использовании системы классификации для изучения образцов тканей под микроскопом. Однако системе классификации злокачественных новообразований часто не хватает точности.
Если клиницисту неясно, является ли поражение полости рта злокачественным, пациенты с предраковыми состояниями должны регулярно обследоваться в течение длительного периода, независимо от уровня их риска. Это может являться серьезным расстройством для пациента, а также дорого обходиться системе здравоохранения. Однако легкий случай может быстро перерасти в рак, и если пациент не знает об этом, обращение за лечением может быть поздним. Отсроченное лечение становится более агрессивным, дорогостоящим и менее успешным.
Старший научный сотрудник доктор Иэн Хатчисон, профессор челюстно-лицевой хирургии в университете Королевы Марии, сказал в пресс-релизе университета: "qMIDS поможет нам выявить пациентов с предраковыми новообразованиями, которые никогда не перерастут в рак, чтобы их можно было успокоить и выписать из больницы. Пациенты с высоким риском предракового развития могут провести небольшую операцию по удалению очага поражения до того, как он трансформируется в рак, тем самым вылечив пациента и избавив его от серьезной операции, что, в свою очередь, снижает затраты на медицинское обслуживание. Это мощный инструмент, особенно при использовании в сочетании с обычной гистопатологической оценкой."
Комментируя важность раннего выявления рака, изобретатель qMIDS доктор Муй-Тек Тех сказал: "Я всегда считал, что раннее выявление рака является ключом к успешному исходу лечения. Выявление рака на ранней стадии означает, что лечение будет более легким и менее вредным. А самое главное, что раннее лечение значительно повышает шансы пациента на излечение."
Несмотря на свои преимущества, тест еще не доступен для использования. "Как молекулярный биолог, я уже более 20 лет исследую гены рака с помощью qPCR [количественной ПЦР]. Поскольку обнаружение этих генов с помощью qPCR настолько надежно и быстро, меня расстраивает, что такая превосходная технология не находит широкого применения для диагностики рака. Недопустимо, чтобы пациентам приходилось ждать от одной до трех недель отчетов о патологии, когда уже существует фантастическая, экономически эффективная технология qPCR, которая может обеспечить результаты в течение нескольких часов," комментирует доктор Тех.
Доктор Тех также отметил, что рак полости рта более распространен в более низших социально-экономических группах, поэтому доступность qMIDS может оптимизировать выявление случаев заболевания в обездоленных и подверженных высокому риску группах населения.
Характеристики теста
Диагностический тест qMIDS может быть проведен на нескольких участках поражения по всей полости рта, где поражены большие участки. Результаты могут быть получены через 90 минут после обращения к специалисту, и тест может выявлять пациентов с раком полости рта как с низким, так и с высоким риском, тем самым улучшая показатели и результаты лечения. Поскольку тест основан на обнаружении химических веществ и автоматизированной цифровой количественной оценке, риск человеческой ошибки сведен к минимуму.
Доктор Тех сказал, что тест qMIDS теперь подходит для клинического проспективного исследования, чтобы подтвердить его диагностические возможности в реальных клинических условиях. Однако необходимо дополнительное финансирование для внедрения и интеграции теста в существующую инфраструктуру здравоохранения, прежде чем он станет доступным для общественного пользования.
Сходство с ПЦР-тестом для выявления SARS-CoV-2
Доктор Тех объяснил, что, как и ПЦР-тесты на COVID-19, тест qMIDS обнаруживает РНК. Кроме того, оба теста требуют запуска qPCR машину и выполнения анализа. Однако есть два ключевых отличия.
Во-первых, для ПЦР-теста на COVID-19 требуется мазок из носа или полости рта, в то время как для теста qMIDS требуется крошечная биопсия ткани толщиной 1 мм, которую может взять стоматолог-терапевт или хирург-стоматолог. Во-вторых, ПЦР-тесты на COVID-19 обнаруживают нескольких вирусных генов, в то время как тест qMIDS может обнаружить 16 человеческих генов.
Полимеразная цепная реакция в стоматологии. Ценность ПЦР для стоматолога
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод, широко распространившийся в последнее время в клинической диагностике. Метод имитирует естественную репликацию нуклеиновых кислот и позволяет получать фрагменты последовательности ДНК в количествах, достаточных для детекции.
В настоящее время использование ПЦР стремительно расширяется в диагностике инфекционных, онкологических, генетических заболеваний и для идентификации личности. В отличие от И ФА ДНК-диагностика позволяет выявить возбудителя заболевания напрямую — его геном. С помощью специальных схем постановки ПЦР можно определять патогенные организмы в очень низкой концентрации.
ПЦР клинического образца включает в себя три основных этапа: пробоподготовка (выделение ДНК из клинического материала), амплификация (умножение фрагментов ДНК) и регистрация результатов. В каждом цикле число копий амплифицируемого участка удваивается. За 30—40 циклов происходит накопление коротких специфических фрагментов в количестве, достаточном для их дальнейшей детекции.
Детекция продуктов амплификации осуществляется с помощью электрофореза в агарозном геле, или путем гибридизации со специфическим олигонуклеотидным зондом, или с использованием метода масс-спектрометрии и т. д.
Метод ПЦР нашел широкое применение в изучении естественных микробных сообществ как позволяющий обнаружить микроорганизмы, не поддающиеся выявлению другими методами. Основной прием, использующийся исследователями, — применение универсальных праймеров, гибридизующихся с генами рРНК всех микроорганизмов.
Полученные амплифицированные фрагменты ДНК (в идеале столько, сколько видов имеется в данном микросообществе) затем секвенируют — устанавливают последовательность нуклеотидов в них и сравнивают с последовательностями известных микроорганизмов для установления филогенетических отношений.
Если при этом обнаруживаются новые виды, то данные секвенирования можно использовать для разработки новых праймеров для этих новых микроорганизмов. Кроме того, можно грубо оценивать количественное соотношение видов в сообществе, если добавить в среду реакции одновременно универсальный праймер и специфичный для данного вида.
После амплификации определяют их соотношение и рассчитывают приблизительное количество клеток. Метод весьма грубый из-за того, что в геноме разных клеток содержится от 1 до 10 копий генов рРНК и это затрудняет точный подсчет. Быстрый предварительный анализ сообщества осуществляли Li и соавт., проводившие электрофорез ампликонов в градиенте мочевины и формамида, что позволяло разделить фрагменты ДНК не только по длине, но и в зависимости от содержании G+C (в градиенте мочевины и формамида).
Схема с использованием универсальных праймеров достаточно хорошо работает, если видов в микробном сообществе немного (до 20). При большем количестве видов микроорганизмов, например в ситуации с клиническими образцами, возникают многочисленные технические трудности: недостаточное разрешение полос при электрофорезе, преимущественная амплификация одних генов в ущерб другим, недостаток субстратов для ДНК-полимеразы, неодинаковый лизис микроорганизмов в процессе пробоподготовки и др.
Одной из причин артефактов при изучении микросообществ с помощью ПЦР является формирование химерных последовательностей — соединение последовательностей ДНК из разных видов. Химера образуется, когда недозрелый терминированный ампликон комплементарно присоединяется к нематеринской ДНК-матрице и копируется в последующих циклах ПЦР.
Усиливают образование химерных рДНК следующие факторы: 1) присутствие в среде реакции обрывков ДНК (при выделении) или их накопление вследствие недостаточной продолжительности стадии полимеризации; 2) повышенное количество высококонсервативных повторов; 3) высокая степень родства между исследуемыми организмами. Формирование химерных ДНК дает в результате ложное увеличение биоразнообразия сообщества.
Исследования иммунитета в стоматологии. Оценка местного иммунитета
Установлено, что длительно текущий воспалительный процесс в пародонте часто сопровождается изменением показателей иммунитета как клеточного, так и гуморального. Иммунологические методы исследования позволяют изучить состояние неспецифической и специфической защиты организма.
К факторам неспецифической защиты относятся:
• ПМЯЛ, ретикулярные, тучные клетки, гистиоциты, эозинофилы;
• фибронектин, лизоцим, простагландины (Е, F, А), интерферон, пропердин;
• система комплемента.
Включение специфических иммунных реакций в патогенетические факторы воспаления десны обусловливает генерализацию этого патологического процесса и его переход в хроническую фазу.
Оценка местного иммунитета
Для изучения состояния местных факторов защиты исследуют смешанную нестимулированную слюну. Определяют следующие показатели: 1) уровень лизоцима как неспецифического фактора защиты; 2) концентрация секреторного IgA.
Определение концентрации лизоцима в смешанной слюне. Исследование концентрации лизоцима проводят методом диффузии в агаре, содержащем 0,05 % порошка биомассы Micrococcus lisodeicticus.
Определение секреторного иммуноглобулина А в смешанной слюне. IgA — это секреторные иммуноглобулины, включающие два субкласса: IgAl (90 %) и IgA2 (10 %).
Определение уровня IgA в слюне проводят с использованием моноспецифических антисывороток к секреторному IgA с помощью ИФА.
При иммунологическом исследовании периферической крови оценивают состояние клеточной неспецифической зашиты (состояние Т- и В-систем иммунитета, функциональная активность ПМЯЛ), а также специфических факторов защиты (содержание сывороточных антител к пародонтопатогенным бактериям).
Оценка клеточной неспецифической защиты. При исследовании клеточной неспецифической защиты оценивают состояние Т- и В-систем иммунитета:
• определение содержания Т-лимфоцитов (CD3+) и их субпопуляций: Т-хелперов (CD4+); Т-киллеров (CD16+) и Т-супрессоров (CD8+), иммунорегуляторный индекс — соотношение Т-хелперов и Т-супрессоров);
• определение количества В-лимфоцитов (CD22+) проводят по методу А. Н. Чередеева(1976);
• определение уровня циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови по методу Л. С. Косицкой и соавт. (1983).
Некоторые ученые, в частности К. Armitt и Н. Firatly, считают, что соотношение хелперных и супрессорных популяций лимфоцитов в крови пациентов с ВЗП является показателем активности процесса в пародонте. Иммуногистохимически выявлен повышенный уровень в тканях десны этих пациентов субпопуляций Т-хелперов и понижение Т-супрессоров.
Получены доказательства, что у больных с типичными формами ВЗП в крови снижается содержание Т- и В-лимфоцитов, а также Т-хелперов. При этом резко возрастает число естественных киллеров (CD 16+) и цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+). Это указывает на повышенную агрессивность клеток иммунной системы, что может способствовать развитию клеточных иммунопатологических реакций. Повышение супрессорной активности может рассматриваться как реакция организма, направленная на подавление воспалительных процессов.
Исследование условно-патогенных микроорганизмов методом ПЦР в реальном времени у больных пародонтитом
Полость рта человека населяют разные по видовому составу сообщества микроорганизмов. В их число входят как нормальная флора, так и условно-патогенные микроорганизмы, которые могут являться этиологическими агентами пародонтита. Количественное и качественное выявление ДНК основных пародонтопатогенов позволяет оценить степень дисбиотических нарушений микрофлоры ротовой полости, назначить адекватную терапию и оценить эффективность лечения.
Важная роль микробного фактора в этиологии и патогенезе воспалительных заболеваний пародонта определяет актуальность исследований в этом направлении.
Полость рта можно отнести к одному из идеальных для обитания микроорганизмов биотопов организма человека. Этот биотоп подразделяется на ряд суббиотопов с учетом анатомического строения и других особенностей отделов полости рта: десневую бороздку, язык, пародонтальный карман. Видовой состав микрофлоры этих суббиотопов напрямую зависит как от местных факторов защиты, так и от общих. К местным факторам можно отнести слюну и механизмы резистентности самой слизистой оболочки: фагоцитоз, выработка макрофагами и другими клетками биологически активных веществ, цитокинов.
Нормальная микрофлора ротовой полости играет не последнюю роль в защите организма человека от заболеваний. Практически у любого человека в полости рта, кроме ее естественных обитателей (нормофлоры, представленной лакто- и бифидобактериями), выявляются условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.
Нарушение количественных соотношений между нормальной и условно-патогенной флорой приводит к развитию дисбиотических состояний и характеризуется снижением количества лакто- и бифидобактерий и ростом условно-патогенных микроорганизмов.
При пародонтите всегда имеют место дисбиотические нарушения. Доказано, что развитие пародонтита наиболее часто ассоциируется с увеличением количества и персистенцией в тканях пародонта Prevotella intermedia, Tannerella forsythensis, Treponema denticola, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis.
Основная трудность выявления указанных патогенов связана с проблемой культивирования анаэробных микроорганизмов и количественной оценкой результатов. Современные бактериологические лаборатории не всегда располагают необходимым оборудованием и питательными средами для культивирования облигатно-анаэробных микроорганизмов. В настоящее время в научных и практических исследованиях в области диагностики инфекционных заболеваний широкое распространение получил метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Использование ПЦР в реальном времени позволяет точно анализировать состав микрофлоры в десневой жидкости, зубной бляшке, слюне, выявляя ДНК искомых микроорганизмов в сложной смеси нуклеиновых кислот, а определение количества микроорганизмов обеспечивает возможность динамического наблюдения, что помогает адекватному выбору этиотропной терапии и оценке ее эффективности.
Целью настоящего исследования явилось выявление патогенных микроорганизмов в разных суббиотопах полости рта у больных пародонтитом и здоровых лиц методом ПЦР в реальном времени.
Материал и методы
ПЦР-диагностика десневой жидкости, зубных отложений, слюны проведена у 34 больных пародонтитом (20 женщин и 14 мужчин в возрасте от 27 до 65 лет) и 39 здоровых лиц (20 женщин и 19 мужчин в возрасте от 27 до 65 лет). Последние считали себя практически здоровыми, не имеющими сопутствующей патологии, полость рта у них была санирована, в тканях пародонта отсутствовали воспалительные изменения.
В группу больных пародонтитом вошли пациенты, не имевшие тяжелой фоновой патологии внутренних органов и систем, которая могла бы оказать заметное влияние на течение патологического процесса в пародонте. 62% из них обратились за помощью впервые, а 38% ранее лечились, за помощью обращались 1 раз в год. В зависимости от степени тяжести хронического генерализованного пародонтита их подразделили на 3 группы: с легкой степенью заболевания — 8 (23,5%) человек; со средней — 12 (35,3%); с тяжелым течением заболевания — 14 (41,2%).
Десневую жидкость для исследования отбирали с помощью стерильных бумажных полосок размером 0,3—0,8 мм,
одновременно в пробирку собирали слюну и стерильным ершиком снимали зубной налет.
ДНК для выявления микроорганизмов выделяли по методике «Проба-ГС» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) согласно прилагаемой инструкции. Метод основан на сорбции ДНК на органическом носителе, отмывке примесей с последующей элюцией нуклеиновых кислот с сорбента. ПЦР и определение температуры плавления олигонуклеотидных проб проводили с помощью детектирующего амплификатора «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология»). Для оценки результатов использовали программное обеспечение, прилагающееся к детектирующему амплификатору «ДТ-96».
Для постановки ПЦР в реальном времени использовали реагенты ООО «НПО ДНК-Технология» согласно инструкции производителя.
После амплификации по показателю индикаторного цикла (Ct) рассчитывали количество ДНК исследуемого инфекционного агента. Для исключения ложноотрицательных результатов учитывали показатель амплификации геномной ДНК человека (контроль взятия биологического материала).
Результаты и обсуждение
Полученные данные представлены в табл. 1—4.
Таблица 1. Данные о микроорганизмах у больных пародонтитом легкой степени в разных биотопах полости рта (n=8)
Таблица 2. Данные о микроорганизмах у больных пародонтитом средней тяжести в разных биотопах полости рта (n=16)
Таблица 3. Данные о микроорганизмах у больных пародонтитом тяжелой степени в разных биотопах полости рта (n=10)
Таблица 4. Показатели у лиц со здоровым пародонтом (n=39)
Как видно из табл. 4, у здоровых людей в исследуемых средах — слюне, десневой жидкости, зубной бляшке — изучаемые микроорганизмы обнаруживали в единичных случаях. У больных пародонтитом в десневой жидкости, зубных отложениях и слюне отмечали повышение количества Pr. intermedia, P. gingivalis, T. forsythensis, Tr. denticola. Микроорганизм A. actinomycetemcomitans выявляли в единичных случаях. Количество P. gingivalis зависело от степени тяжести заболевания, у больных с тяжелым течением заболевания этот показатель был больше.
У большинства пациентов со здоровым пародонтом исследуемых микроорганизмов в десневой жидкости не
выявлялось, в зубных отложениях и слюне обнаруживали T. forsythensis в незначительных количествах.
В группе здоровых лиц в отдельных случаях наибольшее количество микроорганизмов обнаруживалось в зубных отложениях, но и в них их количество не превышало 10 в 6,4 степени ГЭ/образец (для T. forsythensis); других микроорганизмов было еще меньше.
В группе пациентов с пародонтитом легкой степени у большинства обследованных в десневой жидкости выявляли 3 микроорганизма: P. gingivalis (медиана — 10 в 4,4 ГЭ/образец), T. forsythensis (10 в 5,4 степени) и T. denticola (10 в 4,8 степени). В зубных отложениях и слюне были отмечены все микроорганизмы, кроме A. actinomycetemcomitans.
В зубных отложениях пациентов с пародонтитом средней степени тяжести выявлялись все 5 микроорганизмов, тогда как в десневой жидкости и слюне не обнаруживалось A. actinomycetemcomitans.
Самым высоким количество патогенных микроорганизмов у больных пародонтитом было в десневой жидкости и зубных отложениях (до 10 в 8 — 10 в 9 ГЭ/образец), в слюне оно было на 1—2 порядка ниже.
Группы здоровых лиц и больных со средней и тяжелой степенями пародонтита статистически значимо различались по количеству выявленных микроорганизмов. Здоровые и больные с легкой и средней степенями тяжести заболевания различались по количеству всех видов микроорганизмов в десневой жидкости; в зубных отложениях статистически значимо различались количества Pr.intermedia (р=0,0001), P. gingivalis (р=2,8х10 в —7 степени), T. forsythensis (p=l,6х10 в —6 степени) и Tr. denticola (p=3х10 в —5 степени), в слюне — P. gingivalis (p=0,0003) и T. forsythensis (p=0,01). Группа больных с тяжелой степенью пародонтита по исследуемым показателям статистически значимо отличалась от группы здоровых лиц по количеству всех выявляемых микроорганизмов в десневой жидкости и зубных отложениях, а в слюне были найдены достоверные различия между группами только по количеству P. gingivalis (р=8х10 в —5 степени), T. forsythensis (р=0,003) и Tr. denticola (р=1,6х10 в —4 степени). Таким образом, в качестве материала для исследования по 5 основным пародонтопатогенам наиболее репрезентативными являются зубные отложения и десневая жидкость.
На рис. 1 и 2 представлено количество микроорганизмов через 1 мес после лечения: снятие зубных отложений, противовоспалительная терапия, хирургический кюретаж.
Рис. 1. Количество выявляемых микроорганизмов у больных пародонтитом через 1 мес после лечения (десневая жидкость).
Рис. 2. Количество выявляемых микроорганизмов у больных пародонтитом через 1 мес после лечения (зубные отложения).
Исследованием установлены различия в снижении уровня микроорганизмов. В десневой жидкости после лечения выявлялась Tr. denticola, а в зубных отложениях — Pr. intermedia и P. gingivalis.
Полученные нами данные доказывают участие микроорганизмов зубной бляшки и других суббиотопов полости рта в развитии воспалительных заболеваний пародонта. Данная патология развивается на фоне изменения количества и качественного состава микрофлоры полости рта, что приводит к появлению и размножению условно-патогенной микрофлоры, вызывающей воспаление в пародонте.
Группы здоровых и больных достоверно различались по количеству 5 основных пародонтопатогенных микроорганизмов. По-видимому, для развития воспалительных заболеваний пародонта принципиальным является не только количество каждого конкретного условно-патогенного микроорганизма, но и число видов, принимающих участие в развитии патологического процесса. В качестве материала для исследования предпочтительны зубные отложения и десневая жидкость.
ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени — достаточно точный метод изучения количественного и качественного состава пародонтопатогенной микрофлоры ротовой полости. Исследование 5 пародонтопатогенных микроорганизмов в различных суббиотопах ротовой полости целесообразно проводить при выборе терапии и для оценки эффективности проведенного лечения.
Читайте также: