Иммуногистохимия опухолей. Маркерные белки промежуточных волокон.

Обновлено: 02.05.2024

Гистохимия опухоли. Гистохимические особенности опухолей.

Вопреки распространенному взгляду о сходстве биохимических свойств опухолей различного гистогенеза и гистологического строения сравнительный гистохимический я налил исходных гомологичных нормальных тканей и соответствующих опухолей позволил установить, что одни и те же гистохимические признаки в опухолях в зависимости от их гистогенеза, степени дифференцировки, клинического поведения изменяются в различных направлениях и в неодинаковой степени исчезают или появляются вновь, ослабляются или усиливаются, остаются неизмененными или колеблются в процессе прогрессии опухоли. Это ведет к выраженной гистохимической гетерогенности опухолей как различной, так и одинаковой локализации и гистологического строения.

В свете тех представлений о причинах формирования ультраструктурной гетерогенности новообразований человека, которые изложены выше, ясно, что гистохимическая гетерогенность опухолей также связана с направлением и степенью дифференцировки составляющих их клеток. Понимание причин происхождения гистохимической гетерогенности новообразований позволяет наметить некоторые принципы поиска, необходимых в практической онкологий для диагностики опухолей, установления их гистогенеза, определения прогноза и решения других проблем, стоящих перед патологоанатомами.

Возможность использования гистохимических методов для первичной диагностики новообразований основана на существующих гистохимических различиях между гомологичной и опухолевой тканью.
Дифференциальная диагностика опухолей различной локализации перспективна в связи с наличием гистохимических различий между соответствующими опухолями.
Установление гистогенеза новообразований может основываться на сохранности в них гистохимических признаков гомологичных тканей.

Гистологическая характеристика герминогенных опухолей яичка (х200):
(а) чистая семинома;
(б) дифференцированная злокачественная тератома; хрящевые и гладко-мышечные структуры в составе опухоли показаны стрелкой;
(в) злокачественная тератома промежуточного типа; видны дифференцированные клетки эпителия; клетки эмбрионального рака показаны стрелкой.

Следует подчеркнуть, что гистохимические критерии, позволяющие установить диагноз и гистогенез новообразования, судить о прогнозе заболевания для каждого вида опухоли или группы опухолей, как правило, различны.

Нахождение точных гистохимических критериев невозможно. Так, было найдено, что активность глюкозо-6-фосфатазы и эстеразы очень высока в нормальных гепатоцитах и в участках их пролиферации, но она исчезает или резко снижается в опухолевых клетках рака печени. Для опухолей другой локализации определение глюкозо-6-фосфатазы может не иметь такого диагностического значения.

В патологоанатомнческой практике нередко возникают затруднения при проведении дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных опухолей, а также опухолей различного происхождения. Здесь определенную помощь могут оказать гистохимические методы. Так, например, сравнительное гистохимическое изучение широкого ферментативного профиля новообразований молочной железы показало, что в опухолевых клетках, как правило, исчезает активность фосфорилазы, аминопептидазы, аденозинтрифосфатазы, щелочной фосфатазы, которые при фиброзно-кистозиой мастопатии и фиброаденоме обычно достаточно высоки. В тех случаях, когда на основании обычного гистологического исследования трудно решить вопрос о характере роста в молочной железе (доброкачественный или злокачественный), помощь может оказать определение этих ферментов. Следует подчеркнуть, что в связи с возможными в отдельных случаях колебаниями ферментативной активности более достоверным будет исследование всей указанной группы ферментов и ее изменение в одном соответствующем направлении.
Весьма перспективно использование гистохимических методов с целью дифференциальной диагностики и определения гистогеиетнческой принадлежности опухолей.

Как уже было отмечено, гистогенетическое изучение опухолей основано на сохранении в опухолевых клетках гистохимических признаков соответствующих нормальных гомологичных клеток. В серии исследований был уточнен клеточный состав эпителия щитовидной железы, в которой, как оказалось, следует различать, по крайней мере, 3 самостоятельных вида клеток фолликулярные клетки, или А-клетки; парафолликуляр-ные, или С-клетки и клетки Ашкинази, или В-клетки. Их функции н гистохимические свойства различны. В частности, было показано, что В-клетки щитовидной железы содержат биогенный моноамин серотонин и в отличие от других элементов этого органа (А-клеток, синтезирующих тироксин, и С-клеток, вырабатывающих кальцитонин) обладают очень высокой активностью многих ферментов, из которых гистохимическое выявление сукцинатдегидрогеназы может быть их надежным маркером. Обнаружение гистохимических критериев, имеющих дифференциально-диагностическое значение для опухолей щитовидной железы, позволило разработать классификацию новообразований этого органа, основанную на клиническом, морфологическом н гистогенетическом принципах, что важно в практическом отношении, так как новообразования этого органа различного гистогенеза имеют неодинаковое клиническое течение и прогнозю.
Использование гистохимических методов в изучении гистогенеза опухолей скелета также оказалось перспективным.

В опухолевых клетках многих аденокарцином может быть положительной реакция на кислую фосфатазу, но особенно высокая активность этого фермента — в клетках аденокарцином предстательной железы. В опухолевых клетках аденокарцином легкого, эндометрия, яичников и почек часто выявляется высокая активность щелочной фосфатазы, поэтому указанные опухоли отличаются от новообразований желудочно-кишечного тракта, рака молочной железы и некоторых других локализаций. В свою очередь в опухолях желудочно-кишечного тракта часто имеется высокая активность арилсульфатазы. Аминопептидаза дает положительную реакцию в ряде опухолей желудка, мочевого пузыря, почек.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Иммуногистохимия опухолей. Маркерные белки промежуточных волокон.

Гистогенетическая диагностика опухолей. Анализ ДНК опухоли.

Большие перспективы в диагностике рака, по-видимому, имеет количественная оценка ДНК в опухолевых клетках, основанная на автоматическом подсчете клеточной популяции по степени плотности составляющих ее элементов. В опухолях количество полиплоидных клеток значительно возрастает, о чем говорилось выше. Приборы, основанные на проточной цитометрии, анализирующие один или одновременно несколько параметров в каждой одиночной клетке, дают полное представление о популяции в целом. Кроме количества ДНК, этими параметрами могут быть различные показатели. В частности, могут быть использованы количественные гистохимические и иммукогистохнмические методы выявления в качестве маркеров опухолевых клеток различные ферменты — кислая и щелочная фосфатаза, катепсии В, неспецнфнческая эстераза, глюкуронидаза, глютамнлтрансфераза и др., активность которых в ряде новообразований изменяется.

Наряду с относительно стабильными гистохимическими свойствами, которые лежат в основе идентификации разработанных выше признаков опухолей, связанных с их гистогенетической диагностикой, в опухолевых клетках встречаются также гистохимические изменения, обусловленные их прогрессией Например, оказалось, что колебания некоторых гистохимических показателей в опухолевых клетках коррелируют с клиническим течением н, главным образом, с прогнозом заболевания. В частности, так обстоит дело при остром лейкозе у детей, при котором степень активности фермента пентозного цикла — глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы — находится в прямой связи с клиническим развитием болезни и является прогностическим тестом при определении дальнейшего течения острого лейкоза у детей. Выявление в период обострения в мазках костного мозга больных детей 50—80% властных клеток с низкой или отрицательной активностью глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы указывает на плохой прогноз и возможность быстрого летального исхода Обнаружение же в пунктате более 50—80% бластных клеток с высокой активностью этого фермента говорит о возможности длительной ремиссии.

Описанные гистохимические свойства той или иной опухоли могут значи тельно колебаться, что необходимо учитывать при использовании данных мето дов в диагностике. Эти колебания обусловлены главным образом степенью и типом дифференцировки опухолевых клеток, адаптацией их к условиям существования, особенностями васкуляризации, прогрессии опухолей.

В заключение необходимо напомнить, что для проведения большинства гистохимических реакции, особенно связанных с выявлением ферментов, необходимо иметь свежий материал или использовать специальные методы фиксации. Это в определенной степени может ограничивать использование гистохимии в практической работе патологоанатомов.
Гистохимические признаки различных опухолей человека были суммированы Цугибе.

В предыдущих статьях было показано, что опухолевые клетки на ультраструктурном и гистохимическом уровне сохраняют способность к специфической диффереицировке в пределах, свойственных тем камбиальным элементам, которые послужили источником их возникновения. Именно эта способность опухолевых клеток определяет формирование гетерогенности их популяции в новообразованиях и лежит в основе развития важнейших свойств опухолевых клеток, которые могут быть с успехом использованы в диагностике, определении гистогенеза, прогноза, при выборе оптимальных способов лечения, создании специализированных классификаций опухолей и при решения других онкологических вопросов.

Имеющаяся информация об иммунологических и иммуногистохимических свойствах опухолевых клеток также позволяет прийти к выводу, что в них сохраняются оргаио-, ткане- и цитоепецифические антигенные особенности, позволяющие достаточно широко использовать в диагностике опухолей человека иммуногистохимию.

Особенно большие перспективы открылись в связи с созданием методов получения моноклональных антител с помощью гибридов. Моиоклональные антитела позволяют обнаруживать самые незначительные антигенные различия между клетками (в одну детерминанту) и давать их количественную оценку. Они обладают абсолютной спеиифичностью и стандартностью, могут быть получены в больших количествах и в любое время, так как продуцирующие их клеточные линии можно законсервировать на неопределенно долгий срок. С помощью обычных антисывороток, полученных путем иммунизации и очистки сыворотки, никогда нельзя достигнуть такой специфичности, чувствительности и стандартизации, какую имеют моиоклональные антитела. Уровень и точность иммунодиагностических исследований зависят от того, в какой мере в них используются моиоклональные антитела.

Выявляемые иммуногистохимическими методами антигены опухолевых клеток могут быть разделены на 4 группы антигены промежуточных и миогенных волокон, так называемые диффереицировочные антигены клеточной мембраны, секретируемые антигены, антигены экспрессии онкогенов.

Электронная микроскопия позволила выявить в клетках тонкие (актиноеые) волокна толщиной около 6 им, промежуточные волокна толщиной 7—11 нм и микротрубочки толщиной 24 нм.

Промежуточные волокна участвуют в построении цитоскелета и имеются практически во всех клетках организма. Они связаны с процессами морфогенеза, участвуя в сложных межклеточных взаимодействиях, их значение для функции отдельной клетки, по-видимому, не существенно. В промежуточных волокнах обнаружено 5 основных типов белков виметин, десмин, цитокератин (прекератин), белок нейрофиламентов, белок глиальных фнламентов. В клетках мезенхимального происхождения промежуточные волокна состоят из виметииа, в клетках миогенного характера — из десмина, в эпителиальных клетках — из цитокератнна, в клетках глии — из белка глии, в нервных клетках — из так называемых белков нейрофиламентов. Из этого правила есть небольшие исключения, требующие объяснения.

Так, клетки радужки и хрусталика, являющиеся эпителиальными, содержат промежуточные волокна, построенные из виметииа, гладкомышечные клетки аорты содержат промежуточные волокна преимущественно из внметина, а не из десмина, как все остальные мышечные клетки. В некоторых нейронах нет промежуточных волокон. Перечисленные выше типы белков промежуточных волокон, образуя одно семейство, в то же время четко отличаются друг от друга по физико-химическим (имеют разную молекулярную массу) и иммунологическим свойст вам.

Моноклональные антитела в отличие от поликлоиальных позволяют определять широкий диапазон белков промежуточных волокон — от детерминант общих для всех типов белков до индивидуальных пептидов. Поэтому белки промежуточных волокон, как справедливо подчеркивает Г. А. Банников (1984), могут служить прекрасными маркерами определенного типа клеток как в исследованиях по изучению нормативного эмбриогенеза и дефференцировкн, так н при исследованиях патологических процессов, в частности, опухолевом росте.

Белки промежуточных волокон клетки эпителиального происхождения — цитокератины — составляют наибольшую группу, включающую 19 различных полипептидов, которые определенным образом распределены в эпителиальных тканях. Цитокератины многослойного и однослойного эпителия, клеток базаль-ного и шиповатого слоев, эпителиальные клетки различных внутренних органов содержат разные цитокератины или их наборы, причем в одном органе может выявляться значительная гетерогенность клеток по признаку содержания в них цнтокератинов. Распределение цитокератинов в различных эпителиальных клетках строго специфично.

Имеются наблюдения о том, что в некоторых клетках встречаются два типа белков, принадлежащих к промежуточным волокнам различного тканевого происхождения. Десмин и виметин обнаружены в мезангиальных клетках почки и в гладкомышечных клетках аорты. Некоторые астроциты содержат белок глиальных фила ментов и виметин. Перечисленные исключения, с одной стороны, подтверждают правило о высокой специфичности белков промежуточных волокон как маркеров тканевого происхождения клеток, с другой — требуют пересмотра некоторых, казалось бы, устоявшихся представлений о гистогенезе отдельных типов клеток.

Г. А. Банников (1984) проанализировал сведения о сроках появления белков промежуточных волокон в онтогенезе. Первыми на стадии поздней морулы появляются цитокератины вначале — цитокератины однослойных эядодермальных, затем многослойных эктодермальных клеток. Десмин, белок глиальных и нейроиальных фила ментов в полной мере появляются в лостнатальном периоде. Сроки появления виметина в онтогенезе сильно колеблются. В париетальной эндодерме эмбриона происходит одновременная выработка цитокератина и виметина, у взрослых виметин из этой ткани исчезает. Клетки мезодермы синтезируют виметин, многочисленные мезенхимальные клетки, возникшие из мезодермы, продолжают синтезировать виметин во взрослом организме, различные виды мышечной ткани переключаются в этот период онтогенеза на синтез десмина. Эпителиальные ткани, возникшие из мезодермы, например почки, переключаются с синтеза виметина на синтез цитокератинов. При развитии нейронов виметин полностью заменяется белком нейральных филаментов. В глиальных клетках также синтез виметина замещается синтезом белков глиальных филаментов.

Накопление фактического материала о закономерностях синтеза белков промежуточных волокон в эмбриогенезе крайне важно для понимания этих закономерностей в опухолевых клетках.

Иммуногистохимическое изучение с помощью моноклональных антител белков промежуточных волокон в опухолевых клетках различных эпителиальных и мезенхнмальных новообразований показало, что в них стойко сохраняются те белки, которые характерны для промежуточных волокон нормальных клеток, явившихся источником развития данной опухоли, причем сохранность белков не зависит от степени катаплазии опухолевых клеток и зрелости новообразования в целом.

На клиническом материале были исследованы раковые опухоли молочной железы, толстой кишки, кожи, легких, щитовидной железы, почки, печени, различные саркомы мышечного, нейрогенного, фибробластического происхождения, разнообразные типы лимфосарком и т. д. Во всех случаях в опухолевых клетках эпителиального происхождения обнаружены различные цитокератины, в опухолях мышечного происхождения — десмин, иногда в сочетании с виметином; в новообразованиях глиального происхождения — белок глиальных филаментов, в нейрогекных опухолях — белки нейрофнла ментов Следует подчеркнуть, что в раковых опухолях, как правило, сохраняется сложный набор цитокератинов, присущий промежуточным волокнам гомологичных нормальных клеток 8 некоторых раках опухолевые клетки содержат неполный набор цитокератинов, характерных для соответствующих нормальных тканей. Это явление может быть объяснено развитием в новообразованиях ограниченного набора типов опухолевых дифференцированных клеток или ограниченной степенью дифференцировки, о чем свидетельствуют электронно-микроскопические исследования.

С электронно-микроскопических позиций может быть объяснен к редкий случай обнаружения в одном новообразовании анально-ректальной области опухолевых клеток с различными цитокератинами, свойственными разным эпителиальным тканям (железистому н многослойному плоскому эпителиям). При ультраструктурном исследовании в одном и том же новообразовании нередко обнаруживаются клетки с признаками и плоского (тонофибриллы и т. д.), и железистого эпителия. В электронно-микроскопической идентификации нуждаются и редкие случаи, когда в раковых опухолях клетки содержатся цитокератины, отсутствующие в дифференцированных клетках исходной ткани. Как показал ультраструктурный анализ, некоторые новообразования состоят только из недифференцированных клеток, которые могут содержать другие цитокератины, чем соответствующие дифференцированные клетки.

Иммуногистохимия

Иммуногистохимия, или иммуногистохимический анализ — исследование, во время которого в образцах ткани с помощью антител выявляют определенные молекулы. Этот метод диагностики нашел широкое применение в онкологии.

Немного теории и истории. Для того чтобы обнаруживать и уничтожать чужеродные вещества, иммунная система использует особые молекулы — антитела. Они отличаются специфичностью: каждое антитело может связываться строго с определенным антигеном.

В 1941 году американский иммунолог Альберт Кунс впервые решил использовать антитела в лаборатории, чтобы «распознавать» с помощью них белки бактерий. В 1984 году биохимик из Аргентины Сезар Мильштейн получил Нобелевскую премию за то, что создал гибрид опухолевой клетки с лимфоцитом, которая могла синтезировать моноклональные антитела. После этого началось производство моноклональных антител для диагностических и лечебных целей.

В 1994 г. С. Тэйлор применил иммуногистохимический анализ, чтобы проверить 20 000 опухолей, и обнаружил, что диагнозы в половине случаев были ошибочными. Иммуногистохимия зарекомендовала себя как эффективный метод диагностики.

Какие задачи в онкологии помогает решать иммуногистохимия?

Иммуногистохимический анализ помогает врачам-онкологам:

Отнести злокачественную опухоль к тому или иному типу.
Выяснить, в каких генах опухолевых клеток произошли мутации, какие белки способствуют прогрессированию рака.
Выявить первичную опухоль и ее метастазы.
Определить, произошла ли злокачественная трансформация клеток.
Определить прогноз для пациента.
Разобраться, поможет ли в данном случае таргетная терапия.
Определить, чувствительны ли опухолевые клетки к химиотерапии, лучевой терапии.

Как это работает?

Иммуногистохимия бывает прямой и непрямой. В первом случае используют один вид антител, которые должны вступить в связь с определенной молекулой-мишенью. Если молекула-мишень присутствует в ткани, и реакция произошла, опухолевая ткань окрашивается:

Чаще всего к антителу присоединяют фермент, например, пероксидазу. Этот фермент катализирует химическую реакцию, которая приводит к изменению цвета.
Иногда к антителу присоединяют флюоресцин или родамин, при этом окрашивание выявляют с помощью флюоресцентной микроскопии.
всего применяют непрямую иммуногистохимию. При этом используют два антитела. Одно соединяется с антигеном, второе — с полученным комплексом антиген-антитело. Маркер, который вызовет изменение цвета, связывают со вторым антителом.

Непрямой метод имеет некоторые преимущества:

Он обладает более высокой чувствительностью, потому что с одним первичным антителом (тем, которое связывается с белком-мишенью) может связаться несколько вторичных антител.
Исследование занимает немного времени: для того, чтобы произошла реакция, нужно примерно 3 часа.
Непрямая иммуногистохимия требует небольшого количества антител. Например, вторичное антитело, направленное на иммуноглобулины кролика, будет реагировать на любое первичное антитело «кроличьего» происхождения. Не нужно создавать много разных видов вторичных антител с окрашивающей или флуоресцентной меткой.

Как проводят исследование?

Для того чтобы выполнить иммуногистохимический анализ, нужно получить опухолевую ткань, то есть провести биопсию. В качестве материала можно использовать столбик ткани, полученный во время трепан-биопсии, фрагмент тканей или даже целый орган, удаленный во время операции.

Образец ткани фиксируют с помощью формальдегида (иногда используют метанол, ацетон и другие фиксаторы — это зависит от того, какой антиген нужно выявить, и реагирует ли он с теми или иными фиксаторами) и погружают в парафин. Парафинизация помогает законсервировать ткань, сохранить ее структуру на длительное время.

Затем ткань, помещенную в парафин, нарезают с помощью специального инструмента — микротома — на слои толщиной 3–5 мкм. Эти тонкие срезы помещают на стекло, покрытое, специальным клеем.

Некоторые образцы слишком чувствительны к реагентам, которые применяют во время вышеописанной процедуры. Их нельзя помещать в парафин. Такие ткани замораживают жидким азотом. Этим альтернативным методом пользуются редко, только в случае необходимости, так как у заморозки есть некоторые недостатки: она делает изображение под микроскопом не таким четким, требует специальных условий хранения образцов. Фиксацию ткани в таких случаях проводят уже после нанесения на стекло и размораживания, ацетоном или формальдегидом.

После того как срезы нанесены на стекло, из них нужно удалить весь парафин, иначе антитела не прореагируют с антигеном. Эта процедура называется депарафинизацией. Ее проводят с помощью ксилола. Затем выполняют еще некоторые подготовительные процедуры, чтобы антитела могли успешно прореагировать с нужными антигенами, и, наконец, проводят непосредственно иммуногистохимический анализ. Обработанную антителами ткань рассматривают под микроскопом, чтобы проверить, окрасилась ли она.

Какие молекулы-мишени выявляют во время иммуногистохимии?

Количество возможных мишеней измеряется сотнями. Перед исследованием врач должен понимать, что он ищет, и использовать соответствующие антитела. В онкологии мишенями являются опухолевые маркеры — вещества, которые в здоровых клетках отсутствуют вообще или присутствуют в значительно меньшем количестве. Вот некоторые примеры:

Рецепторы к эстрогенам и прогестерону помогают идентифицировать гормонально-позитивный рак молочной железы и разобраться, помогут ли женщине гормональные препараты.
Простатспецифический антиген (ПСА) имеет значение в диагностике рака простаты.
Альфа-фетопротеин — присутствует в гепатоцеллюлярной карциноме (рак печени).
Цитокератины помогают в диагностике рака и некоторых сарком (злокачественных опухолей соединительной ткани).
Фермент CD10 (CALLA) связан с карциномой почек, лимфобластным лейкозом.

Какова роль иммуногистохимии в современной онкологии?

Иммуногистохимический анализ помогает изучить характеристики злокачественной опухоли, которые не могут выявить другие методы диагностики. Зачастую это играет важную роль в уточнении диагноза и назначении правильного лечения. Врач может определить, какие комбинации препаратов будут наиболее эффективны для конкретного больного, иными словами, реализуется принцип персонализированного лечения. Зачастую это помогает улучшить результаты, подобрать эффективное лечение для пациентов, которым не помогает стандартная терапия.

ИГХ при раке молочной железы

ИГХ при раке молочной железы — необходимость современной онкологии. Его результаты позволяют подобрать максимально подходящее женщине противоопухолевое лечение.

Что такое иммуногистохимия при РМЖ?

Иммуногистохимический анализ или коротко ИГХ основан на способности иммунитета синтезировать вещества, нейтрализующие инородные агенты — бактерии, вирусы, грибы и выделяемые ими токсины. Инородные агенты — это антигены, в их присутствии иммунные клетки вырабатывают определённое антитело, на каждое антитело имеется свой антиген.

Рак молочной железы умело скрывается от санкций иммунитета, тем не менее раковые клетки и их структурные элементы — антитела, иммунитет их не видит, но ИГХ выявляет эти антитела.

При ИГХ кусочек опухоли обрабатывают реагентами с антигенами, которые находят своё антитело и соединяются с ним, изменяя окраску исследуемого кусочка злокачественной ткани.

Для чего проводят иммуногистохимию при РМЖ?

Иммуногистохимия нужна не для научной работы, а для практического использования:

Обнаружение в клетках рецептора половых гормонов, чувствительного к эстрогену (ЭР) или прогестерону (ПР), прогнозирует чуть более плавное течение рака с меньшей вероятностью метастазирования, с преимущественной локализацией метастазов в костях, большую продолжительность жизни даже при генерализации процесса;
Разная концентрация ЭР и ПР позволяет выбрать для конкретной женщины оптимальное лечение, так при высоком уровне ЭР в сочетании с ПР и даже без них можно рассчитывать на хороший результат гормональной терапии, без рецепторов обязательна химиотерапия;
Наличие в клетке НЕR2 в высокой концентрации указывает на агрессивность рака, что требует химиотерапии и специфического нейтрализатора НЕR2;
Сочетание позитивного гормонального статуса с НЕR2 вызывает сомнения в результативности гормонотерапии, поэтому в программу лечения включается химиотерапия;
Высокая концентрация Ki-67 — свидетельство высокой степени злокачественности и, опять-таки, не позволяет избежать химиотерапии.

Показания к иммуногистохимии при РМЖ

При раке молочной железы для ИГХ только одно показания — определение степени агрессивности рака по его структурным компонентам для подбора оптимальной программы лечения.

Обычный морфологический анализ — гистология показывает степень злокачественности опухоли и её клеточный состав, часто неоднородный, но не позволяет определить белковые структуры:

Чувствительность каждой клетки к лекарствам определяется наличием у нее рецепторов половых гормонов;
Активность клеточного размножение и скорость роста ракового узла контролирует белок НЕR2, если его слишком много, то рак будет расти быстрее и формировать защиту клетки от лекарств вплоть до полной устойчивости;
Способность быстро воспроизводить замену погибшим клеткам, захватывая при этом новые территории, определяет маркер пролиферации Ki-67.

Концентрацию всех этих клеточный субстанций и определяет ИГХ.

Подготовка к исследованию

ИГХ при раке молочной железы проводится вне организма больной, но с кусочком её опухоли. Сегодня всем женщинам с впервые обнаруженным новообразованием в железе на этапе диагностики специальной иглой выполняется биопсия — кор-биопсия.

Взятый небольшой столбик раковой ткани подвергается гистологическому исследованию и ИГХ, что позволяет верифицировать, то есть доказать наличие рака, и планировать первичное лечение. Удалённую во время операции на молочной железе опухоль тоже подвергают гистологическому и ИГХ исследованиям для уточнения плана лечения.

Женщине перед биопсией надо только успокоиться, никакой определенной подготовки от неё не требуется.

Проведение исследования

Взятый при биопсии или из удалённых при операции тканей молочной железы кусочек рака в пробирке с формалином (для консервации) отправляется в патоморфологическую лабораторию. Кусочек разрезается на тончайшие пластинки, которые консервируются на очень длительный срок — несколько десятилетий, чтобы при необходимости имелся материал для анализа. Пластинки также подвергают иммуногистохимии.

ИГХ делается двумя способами: внесённые с реактивом антигены напрямую контактируют с антителами или через антиген-посредник, который сначала ищет свое антителом, а затем этот дуэт находится вторым антигеном, концентрация которого и измеряется.

О чем говорят результаты?

Обнаружение в раке молочной железы рецепторов ЭР и ПР предсказывает относительно доброкачественное течение при эффективности гормональных препаратов, но в реальной жизни опухоль может не среагировать на эндокринную терапию, правда процент устойчивости невысок.

Обнаружение Ki-67 прогнозирует неспокойную жизнь и интенсивное лечение с использованием максимальных возможностей химиотерапии для изменения негативного прогноза болезни.

Рецептор НЕR2 — прогностический фактор, предлагающий сосредоточение на химиотерапии без особых надежд на антигормональное воздействие, но с другой стороны, предсказывает необходимость использование таргетного препарата, связывающего патологический белок.

Расшифровка исследования

Формально считается, что 1% ЭР уже положительно, но до 10% ЭР сомнительна надежда на значимый результат эндокринной терапии. Иммуногистохимический анализ рецепторного статуса рака молочной железы предполагает следующие ответы:

от 0 до 2 баллов — нет гормональной зависимости;
при 3 — 8 баллах — возможна зависимость от эндокринного воздействия, чем больше баллов, тем выше уровень рецепторов, тогда как при 3 баллах только десятая часть раковых клеток имеет рецептор.

Белок Ki-67 констатирует:

меньше 15% — невысокая активность пролиферации;
16% — 30% — умеренная агрессивность;
выше 30% — высокая агрессия.

Определяемые при иммуногистохимии структурные элементы не гарантируют исполнения предначертанного — в процессе лечения рак изменяет свои характеристики. В нашей клинике определяют реальные характеристики злокачественного процесса в конкретный момент времени и подбирают оптимальное лечение по панели из множества генов.

Читайте также: